5×TBE缓冲液，AB64392-500ml

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯

手把手教你做好体外 DNA 重组

液，上下颠倒充分混合，7500×g，4 ℃，离心 5 min，回收上层水相；5. 加入 1/10 倍体积的 65 ℃ 预热 CTAB/NaCl 溶液，上下颠倒混匀；6. 用等体积的氯仿/异戊醇抽提，混匀，离心，回收上层水相；7. 加入 1 倍体积的 CTAB 沉淀液，上下颠倒混匀，如果沉淀可见，继续做步骤 8，也可于 65 ℃ 温育 30 min；8. 500×g，4 ℃，(或约 2700 rpm) 离心 5 min；9. 移出上清，用高盐 TE 缓冲液重悬沉淀 (按每克起始材料加 0.5～1 mL

质粒DNA的提取与鉴定

① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液) 配1000ml 5×TBE: Tris 54g 硼酸 27.5g 0.5mol/l EDTA 20ml Ph8.0 ② 凝胶加样缓冲液(6×) 溴酚蓝 0.25% 蔗糖 40% ③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml 2.制备琼脂糖凝胶 按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表： 琼脂