青霉素链霉素两性霉素B溶液，AB64625-10ml

新手必学：人源与鼠源不同肠道区段的类器官培养操作详解！

文献建立了一套稳定的三维类器官培养方法，适用于人源和鼠源的小肠及大肠不同区段。系统梳理了各肠道区段的隐窝分离方案、类器官培养方法，以及隐窝形态和生长特性。     实验材料 1.隐窝分离试剂 ①无钙镁离子磷酸盐缓冲液（PBS）； ②0.5M乙二AN四乙酸（EDTA）溶液； ③70μm细胞筛； ④洗涤缓冲液：汉克斯平衡盐溶液（HBSS），添加0.5mg/mL庆大霉素、2.5μg/mL两性霉素B、100U/mL青霉素（Pen）和100U/mL链霉素（Strep

细胞培养常用试剂

（1）高糖DMEM溶液 用新配制的三蒸水配制，高糖DMEM干粉（规格10×1L），溶入约总量的1/3的三蒸水，并用水洗净包装袋，在磁力搅拌器上搅拌30分钟，加入NaHCO2 3.75克，补加水至最终量。用1N HCL调整PH为7.2，0.22μm滤膜抽滤除菌，分装-20℃保存，使用时加10%的胎牛血清及双抗溶液（最终浓度：青霉素100U/ml，链霉素 100μg/ml） （2） 胎牛血清 使用前56℃水浴30分钟灭活，无菌条件下分装成10ml包装，-20℃保存。用时

正常成熟破骨细胞原代培养

切割成大小约0.5cm×0.5CM、厚为0.1cm的小块，再用金刚砂轮磨成厚约10—50μm（以便在相差显微镜下观察）的薄骨片。使用前用超声波清洗仪超声洗涤3次，每次约10min。然后依次浸泡在3个盛有含青霉素（1000IU/ml）、链霉素（1000μg/ml）、两性霉素B（3μg/ml）的抗生素溶液的小容器中，每次10—20min。最后可浸于盛有含抗生素的培养液的容器内，置4℃（短期）或-20℃（较长期）冰箱内保存备用； 2. 取生后3—5d的大鼠，拉颈处死后置于盛有75%酒精的容器中，消毒