1xPBS 缓冲液(细胞培养），AB64384-500ml

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯

小鼠肿瘤样本单细胞悬液的制备及注意事项

基或者 PBS 稀释，再用 200 目筛网，除去残留的组织块，并使用5~10倍体积的 1640 基础培养基或者 PBS 缓冲液洗涤一次，过滤至无组织块为止，获得单细胞悬液。 收集细胞悬液，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 研磨法 提前准备好 200 目的一次性细胞筛网，用 1640 基础培养基或者 PBS 润湿并浸泡备用（浸泡放置于 6 cm 细胞培养皿或者 6 孔板）。 将剥离的肿瘤组织转移到 200 目的细胞筛网，用无菌眼科

利用 Millicell 培养小室培养皮肤及肺类器官的实验方案

)或NIH 3T3细胞(93061524)在适当的生长培养基( 胎儿和新生儿细胞的角质形成细胞无血清生长培养基131-500,  成纤维细胞生长培养基116-500)。每隔一天更换新鲜的培养基，培养至细胞达到80 - 90%的融合。 准备胶原蛋白/PHF层(冰上准备)(总容量8ml) a.将6ml大鼠尾胶原蛋白(08-115)加入15ml锥形管中(浓度见批次特定数据表)。 b.加入1.6 mL 5X缓冲液(1.1% NaHCO3, 0.025N NaOH, 100 mM HEPES, 5X