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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
NP-40裂解液
- 库存:
现货
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
50 mL
产品简介:
品牌:Keygen/凯基生物
货号:KGB5206-50
产品名称:NP-40裂解液 KGB5206-50
规格:50 mL
保质期:12个月
储存温度:2-8℃
运输条件:冰袋运输
品牌介绍:
江苏凯基生物技术股份有限公司,是一家深耕生命科学工具产品与服务、聚焦细胞生物学试剂产品、具备诊断产品临床、注册到商业转化能力的生命科学品牌供应商,依托细胞生物学、蛋白与免疫、分子生物学等关键核心技术,已形成完整的自主开发与产销体系,部分生物核心原材料“自主可控”,拥有知识产权90余项,通过ISO9001质量管理体系认证、ISO13485质量管理体系认证、GB/T29490知识产权管理体系认证,是国家专精特新小巨人企业、国家高新技术企业、国家科技部国际合作示范基地、江苏省科技型企业、江苏省生物试剂关键原料工程技术研究中心、江苏省生物医药核心材料绿色制造基地、江苏省服务型制造示范企业。明星产品线包括细胞培养基、无血清冻存液、细胞凋亡、细胞增殖检测试剂盒等。
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文献和实验沉淀中加500 mL的细胞裂解液(10 g/L Np40, 20 mmol/L EDTA, 50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5)]和10 mL蛋白酶K. 在56℃水浴中加热1-2 h, 用苯酚和氯仿提取, 然后用脱水酒精沉淀DNA. 在700 mL/L酒精洗涤一次后加入200 mL TE. 然后再加入RNA酶(最终浓度为50 mL/L), 37℃下过夜. 然后在10 1.3 DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 1×106细胞在含50μg/ml顺铂的培养液中培养12
在使用前现加,其他抑制剂成分可以在水溶液中稳定 5 天。 二、各种成分在工作液中的终浓度 Tris-HCl:50 mM,pH 7.4 NP-40:1% 去氧胆酸钠:0.25% NaCl:150 mM EDTA:1 mM PMSF:1 mM 抑蛋白酶肽,亮抑酶肽,胃蛋白酶抑制剂:各 1 μg/ml Na3VO4:1 mM NaF:1 mM 三、实验步骤 转染后 24~48 h 可收
,比如 RIPA,虽然裂解剧烈,但是无法维持蛋白天然构象,会破坏互作蛋白对。 如果自配,建议采用温和系统,比如 NP40/Triton 0.1%-1%;SDS ≤0.1%,盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合,要考虑孵育(结合)顺序 如果抗体和 beads 先孵育,建议 选择 pH 8.2(更常用)或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y,抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X
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