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HPLC法测定磁性微球及大鼠肝组织中的平阳霉素

，得200 μg.mL-1咖啡因溶液作为内标溶液。 　　取上述PYM标准溶液5 μL，内标溶液10 μL，加重蒸馏水定容至0.2 mL，取20 μL进样，得标准色谱图(图1-A)，PYM及内标的保留时间分别为2.91 min和4.14 min。取新鲜无药鼠肝组织，充分匀浆后离心取上清液0.1 mL，加入10%三氯醋酸0.1 mL，混匀，10 000 r.min-1高速离心10 min，取上清液20 μL进样，得空白色谱图(图1-B)。取新鲜含药鼠肝组织，充分匀浆后离心取上清液0.1 mL，加入内标

【资源】蛋白纯化经验指南（）

的填料,颗粒细点,起始盐浓度高点,这样保证能浓缩好你的样品. 35) 楼主：这段在用离子交换柱过抗体，请问抗体的吸收图谱是怎样的？它的特征吸收峰在哪里，不同的多克隆抗体是不是还有自己的特征吸收峰， 抱歉,你是说色谱图还是紫外吸收图呢,蛋白一般都是在280检测的呀,不同的的蛋白虽然有一点差别,但是那也不是很明显的,其实就用280就可以了. 36) 我的蛋白以GST融合蛋白的形式表达在E Coli中，分子量14~15kDa，蛋白的疏水性很强，等电点在7左右。菌破碎后，用表面活性剂提取的融合

蛋白纯化经验指南

峰， 抱歉，你是说色谱图还是紫外吸收图呢，蛋白一般都是在280检测的呀，不同的的蛋白虽然有一点差别，但是那也不是很明显的，其实就用280就可以了。 36）我的蛋白以GST融合蛋白的形式表达在E Coli中，分子量14~15kDa，蛋白的疏水性很强，等电点在7左右。菌破碎后，用表面活性剂提取的融合蛋白，据文献说是由于此蛋白和细胞膜结合，所以如果不加表面活性剂，上清中电泳检测不到。加表面活性剂后，提取效率还可以。上GST 胶。开始时采用先洗脱融合蛋白，再酶切，洗脱采用10mM GSH洗脱，没有加表面