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文献和实验剂,以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续
O 3.31g Na2HPO4·7H2O 33.77g 重蒸水 至1000ml配制方法:同前。该缓冲液主要用于配制Zamboni's固定液。4、0.5mol/L pH7.6的Tris- HCl缓冲液。试剂:Tris(三羟甲基氨基甲烷) 60.57g 1 N HCl 约420ml 重蒸水 至1000ml配制方法:先以少量重蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用1N的HCl或1N
培养时间可能造成体细胞无性系的变异 [40,41]。因此,来自成熟种子的多芽分生组织,可作为另一种不受基因型影响的具有再生能力的受体组织,用于商业化燕麦品种的遗传转化 [35~47]。采用这一体系,可以高效地进行组织再生且重复性好,获得的转基因植株具有很高的结实率和基因组稳定性。 这里,我们介绍了茎尖分生组织结合基因枪介导,对三个燕麦品种进行遗传转化的方法,以及利用该方法转化抗渗透胁迫基因 hva1,提高燕麦对渗透胁迫的耐受性。此外 ,我们还介绍了对转基因燕麦的分子和生化分析,以证实转基因的整合
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