5-氨基甲基呋喃-3-羧酸盐酸盐 5-Aminomethy

蛋白质翻译后修饰（PTMs)概述

or mass spectrometry.图示：S-亚硝基化 Weste Blot 试剂盒标记和检测 S-亚硝基化的反应。样品首先与 MMTS 反应，封闭 S-亚硝基化蛋白质中的游离巯基。然后用抗坏血酸盐选择性还原 snitroscysteine，并用 Thermo Scientific iodotmt zero 标记试剂进行标记。随后，使用提供的抗 TMT 抗体在免疫印迹中检测 TMT 标记蛋白。5、Methylation：一碳甲基转移至氮或氧（分别为 N-和 O-甲基化）至氨基酸侧链，增加了蛋白质的疏水

DNA甲基化研究方法的回顾与评价(图)

甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变（见图1），行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶，最后,对PCR产物进行测序 并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是一种可靠性及精确度很高的方法，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态，但需要大量的测序 ,过程较为繁琐、昂贵[27]。 图1：重亚硫酸盐处理过程示意图。DNA 经重亚硫酸盐处理后，甲基化的胞嘧啶不变，未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶2.2.3 甲基化特异性的PCR

DNA甲基化研究方法的回顾与评价

化位点明确,实验结果易解释；缺点是：1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中，因此非该序列中的CG将被忽略；2.只有检测与转录相关的关键性位点的甲基化状态时,该检测方法的结果才有意义；3.相对而言，Southern方法较复杂，且需要样本的量大；4.存在着酶不完全消化引起的假阳性的问题；5.不适用于混合样本。 2.2.2 直接测序法 直接测序是由Frommer等[25]提出的研究DNA甲基化方法。过程是：重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变（见图