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55
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广州市左克生物
产品简介:
品牌:MeisenCTCC/浙江美森
货号:CTCC-007-0520-CM
产品名称:小鼠黑素瘤细胞完培Clone M-3 [Cloudman S91 melanoma]-CM
培养体系: F-12K Medium+2.5%FBS+15%HorseSerum+1%Anti-Anti。
品牌介绍:
MeisenCTCC致力于成为国内领先的细胞制品研发与服务公司,始终围绕解决我国生命科学和生物制药长期缺乏标准品资源库的“痛点”,以卓越的品质、高效的服务构建以MeisenCTCC(Meisen Chinese Tissue Culture Collections)为代表的细胞资源平台,为大学院校、科研机构及生物医药研发企业提供高质量、可回溯、品控可靠的生物制品。 除此以外,MeisenCTCC细胞库还积极通过自身研发、学术共享等方式提供多种干细胞类细胞产品,包括iPSC、胚胎干细胞、间充质干细胞等。 MeisenCTCC资源库致力于为科研工作者提供即时、高质量的通用细胞产品,以解决国内细胞生物学研究长期以来面临的细胞进口时间长、运输过程风险大、无售后技术服务的“卡脖子”问题。 目前,MeisenCTCC资源库中已经涵盖高引用的通用细胞系,并不断拓展,力争短期内实现主要细胞产品全覆盖。为保证品质,所有通用细胞产品,皆与溯源库保持一致的质量监控流程与标准,并提供完善的售后技术服务,让所有国内细胞工作者不再为基础培养技术问题所困扰。
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文献和实验一、遗传变异细胞和正常细胞1.小鼠类3T3 胚胎成纤维细胞 L929 成纤维细胞3T3/e 成纤维细胞 Mo-MuLV/3T3 Mo-MuLV感染的3T33T3TK 成纤维细胞 NIH3T3 NIH Swiss小鼠胚细胞3T6 胚胎成纤维细胞 *PA317 胚胎成纤维细胞Ana-1 巨噬细胞 SRSV/3T3 SRSV转化的3T3*CTLL-2 T细胞 2.大鼠类BRL 肝细胞 LW-3 肝细胞BRL 3A 肝细胞
-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed公司;SP免疫组化试剂盒,DAB显色试剂盒购自北京中山生物技术公司。 1.2 细胞培养 断颈处死小鼠,75%乙醇浸泡消毒2min,分离取出胸主动脉,D-Hanks液清洗去除血污,获干净光滑的血管段,用眼科镊固定血管段端,刀片轻刮去外膜结缔组织,再用眼科剪小心剖开血管,刮去内膜层细胞,将血管段剪成1mm×1mm大小的组织块,均匀贴放于25ml培养瓶底面,组织块间隙约2~3mm,加入含10%胎牛
强度进行稳流电泳,当电压达65V时改为稳压电泳。 3.在目的蛋白泳动至距胶下缘1cm以上结束。 四.转膜 1.电泳结束前20分钟左右戴上手套开始准备: 湿转使用常规电转液:Tris 3.0g,Gly 14.4g, M-OH 200ml,加去离子水至1,000ml。干转则取此转移液,每50ml加入10%SDS180ul。 浸泡NC膜:将NC膜平铺于去离子水面,靠毛细作用自然吸水后再完全浸入水中10min以排除气泡,随后浸泡入转移液中。PVDF膜则在M-OH中浸泡20min以上后转入转移液中
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