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- 2025年08月04日
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赛默飞世尔科技
Expi293 GnTI 表达系统试剂盒是 Expi293 平台的一部分，用于哺乳动物 293 细胞的快速、高产量瞬时蛋白表达。系统试剂盒以设计的 Expi293F 细胞为中心，这些细胞无 N-乙酰葡糖胺基转移酶 I (GNTI) 活性，因此缺乏复合物 N-聚糖。通过选择性敲除亲代 Expi293F 细胞中的 GnTI 基因建立 Expi293F GnTI 细胞系。该细胞系是均相糖基化重组蛋白高产表达的有力工具。
Expi293 GnTI 表达系统试剂盒的特点包括：
•表达蛋白的均相 N-糖基化
•与亲代 Expi293F 细胞的蛋白产量等效—高达 1 g/L
•蛋白产量显著高于其他 HEK293 GnTI 细胞系替代品
•在 Expi293 表达培养基中悬浮、高密度培养 Expi293F GnTI 细胞
•利用 ExpiFectamine 293 试剂联合专用转染增强剂进行高效瞬时转染
Expi293 GnTI 表达系统试剂盒包括的组分为：1 瓶冷冻 Expi293F GnTI 细胞、1 L Expi293 表达培养基、1 个 足以转染 1 L 培养物的 ExpiFectamine 293 转染试剂盒、100 mL Opti-Plex 络合缓冲液、1 个 PNGase F 聚糖切割试剂盒和 pRABBIT IgG IRES-EmGFP 阳性对照载体。Expi293 GnTI 表达系统的所有组分也可单独购买。
• 1 L Expi293 表达培养基，储存于 2–8°C（避光储存）
• ExpiFectamine 293 转染试剂盒，用于 1 L 培养，储存于 2–8°C
• 100 mL Opti-Plex 络合缓冲液，储存于 2–8°C（避光储存）
• PNGase F 聚糖切割试剂盒，储存于 -20°C
• pRABBIT IgG IRES-EmGFP 阳性对照载体，储存于 2–8°C 下或长期存储于 20°C 下
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文献和实验载体克隆到腺病毒载体 -- 0-15天 4天 获得重组腺病毒 14-21天 17-22天 4-7天 噬斑纯化 5-10天 0-5天 -- 总计 26-45天 24-56天 10-17天 以体外连接方法为基础 (by Mizuguchi和Kay)，CLONTECH的Adeno-X™表达系统提供了一种快速、高效构建重组腺病毒的方法。只需4至7天就可以获得重组腺病毒，如图1所示。由于经过7天的培养之后HEK 293细胞会渐渐失去对培养皿的附着而扩散，导致噬斑融合，用传统方法制备重组腺病毒往往需要铺平
形DNA结构、Holliday结构等，故易出现假阳性；测序耗时长（1-3天），常常出现测序无信号等问题。 今年年初，Genloci通过植物基因工程表达产生高纯度的Cruiser™酶，它是一种具天然强活性的核酸内切酶，与CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点，并从突变位点的3’-端高效地切割异源双链DNA，不会出现假阳性。 今年6月，Genloci推出Cruiser™基因敲除检测试剂盒，该试剂盒可广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因的敲除，尤其适用于ZFN
Upstate公司在世界上最先开发出步骤优化简洁的商业化ChIP分析试剂盒，保证实验的准确性和可重复性，同时Upstate提供广泛可行的ChIP级别应用抗体。ChIP基本试剂盒和特定蛋白 质ChIP级别应用抗体结合完成一个完整的染色质免疫沉淀分析。在过去的数年中，Upstate提供的ChIP分析试剂盒和ChIP级别应用抗体得到了全世界科学家的认可，文献应用极为广泛。 Upstate最新推出EZ Chip™（catalog #:17-371）分析试剂盒，较第一
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