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文献和实验流式细胞仪、免疫磁珠及亲和板结合分离法分选c kit+肝癌细胞的比较
季青公司;兔抗人c kit多克隆抗体、FITC标记的羊抗兔IgG(1∶200)购自丹麦Santa Cruz公司;抗兔IgG1免疫磁珠购自德国Miltenyi Biotech公司;其他常用试剂为国产分析纯。 1.1.4 主要仪器:免疫磁珠分选磁力架、MS磁性分离柱购自德国Miltenyi Biotec公司;Epics Altra型流式细胞仪购自美国Beckman Coulter公司;各种常用耗材购自广州威佳科技公司。1.2 方法 1.2.1 分离、培养肝癌细胞:参考文献方法,分离
(4) 兔抗TNF多克隆抗体 (5) FITC标记的羊抗兔IgG (6) 圆底96孔细胞培养板,离心机,温浴箱,刻度吸管,毛细吸管,加样器(头),CO2 培养箱,流式细胞液,细胞计数板 【操作步骤】 (1) 将单核/巨噬细胞加或不加激活剂,37℃,5%CO2 培养箱中培养一定时间; (2) 将单核/巨噬细胞悬液以2000r/min离心10min, 弃上清; (3)
激光共聚焦法检测外源性TFPI-1与大鼠MsC膜上TF的结合情况
转导通路,从而引起细胞增殖。因此推测TFPI-1可能与肾小球系膜细胞膜上TF相结合,抑制TF介导的细胞增殖信号通路,引起大鼠’肾小球系膜细胞凋亡。这种推测用激光共聚焦的方法来加以证实。 1.材料 (1)培养在盖玻片上融合程度达到60%一70%的细胞。 (2)兔抗TFPI-1多克隆抗体、小鼠抗TF单克隆抗体,FITC马抗鼠IgG,TRITC羊抗兔IgG。 (3)冷丙酮固定液(一20~C预冷20min)。 (4)0.01mol/
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