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文献和实验2. 染色步骤 (1)染色:加入适量配制好的GUS 染液于24孔板的孔中,将待测样品浸到GUS染液中,将24孔板置于37℃保温箱中放置6 h。 (2)漂洗:先后用50%,70%,100%的乙醇漂洗样品,每次浸泡5分钟。 (3)脱色:加入100%乙醇浸泡直至完全脱色。 (4)记录:在体视显微镜下拍照记录。 二、GUS报导基因的定量检测 GUS 能与底物MUG(分子量352.3,4-甲基伞型酮-β-葡萄糖醛酸苷,4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide
增厚。大量的虫体可引起阻塞、胆汁滞留,如合并细菌感染可引起胆管炎和胆管肝炎。慢性感染可有大量的结缔纤维组织增生,附近的肝实质可用明显萎缩。目前一般认为虫卵、死亡的虫体及其碎片、脱落的胆道感染,破坏了胆道上皮的正常结构及功能,导致胆汗中细菌性β-葡萄糖醛酸苷酶活性升高,其结果有利于难溶性胆红素钙的形成;胆道分泌糖蛋白的增多,并附着于虫卵表面作为结石核心,起支架和粘附剂作用,促进胆红素钙的沉积,最后导致色素类结石(即肝内多发性结石)的出现(郭日波等,1990)。此外,国内外一些资料不断提示华支睾
DNA ( 高压后的鲱鱼精 DNA,5 g/L ) ( 15 ) OLB ( 寡核苷酸标记缓冲液):2 ml ( 1.25 mol/L Tris-HCl,pH 8.0 和 0.125 mol/L MgCl2) ,36 μl β-巯基乙醇,10 μl dATP,10 μl dTTP,10 μl dGTP,5165 μl 的 2 mol/L 羟乙基哌嗪乙硫磺酸(pH 6.6 ),3099 μl 的 90 OD260 U 随机引物/μl ( 16 ) BSA ( 小牛血清白蛋白,50 mg
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