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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
125ML/500ML
| 规格: | 125ML | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500ML | 产品价格: | 询价 |
产品简介:
品牌:iCell/赛百慷
货号:iCell-h646-001b
产品名称:HT29 MTX E12细胞专用培养基
产品中文名称:
甲氨蝶呤诱导HT29细胞分化为成熟杯状细胞
细胞专用培养基成分:
DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA +1%P/S
品牌介绍:
专注于研发生产高品质的人体组织源及动物组织源的原代细胞、细胞系、iPS细胞等产品,提供以及相关的CRO,CMO服务,同时也为客户提供相关培养体系,培养基等试剂。在中国,iCell除与中国科学院细胞库合作外,还与各地医学学院、机构、药企合作,其中包括:上海交通大学医学院,复旦大学医学院,生物在线,中国生物器材网,丁香通以及一些国内知名医药药企进行深度合作。
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文献和实验,PEG-4000:由博德公司李勇老师惠赠。DMEM培养基:由美国GIBCO公司生产。小牛血清:由杭州四季青工程材料研究所生产。RPHA试剂盒:兰州生物制品研究所生产。 1.2 方法 [2] 1.2.1 NS-1细胞的制备 为确保细胞对HAT培养基的敏感性,复苏稳定后,移种于含1%8-AG的DMEM培养基中,融合前1周换用无8-AG的培养液。 1.2.2 CHO-C 28 细胞的制备 复苏稳定的细胞,融合前用不含MTX的培养基传代一次,备用
可更好地表达外源蛋白,外源基因在CHO细胞中扩增是提高表达水平的重要策略之一。 DHFR基因扩增系统 DHFR基因扩增系统最常用,当携带DHFR基因的表达质粒转染CHO细胞后,或携带DHFR基因的标志质粒与携带外源基因的表达质粒共转染CHO-DHFR-细胞后,可以得到在选择培养基生长的细胞克隆,DHFR可被叶酸类似物氨甲喋呤(Amethopterin,MTX)所抑制,不断提高MTX浓度,绝大多数细胞死亡,但在极少数幸存下来的抗性细胞中,DHFR基因均得以扩增。进行性选择抗氨甲喋呤的细胞
剪接信号;④终止信号和poIyA加尾信号。为了将含目的基因的载体导入哺乳动物功物细胞.还必须加入遗传选择标记。常用的标记基因有胸腺激酶(tk)基因、二氢叶酸还原酶(dh]r)基因、新霉素(neo)抗性基因、氯霉素乙酰基转移酶(cat)基因等dhfr还可作为共扩增基因使外源基因的表达产物增加。当培养基中逐新增加氨甲蝶呤(MTX)的浓度时,随着细胞对MTX抗体的增加。dhfr基因与外源基因均明显扩增。据文献报道,在不断提高的选择压力下,dhfr及侧翼序列能扩增至上千个拷贝,大大增加目的基因的表达
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