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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
StarPure Plasmid Miniprep Kit(Column Based)
- 保质期:
18个月
- 供应商:
北京启衡星生物科技有限公司
- 保存条件:
-25 ~ -15℃
- 规格:
10rxns/50rxns
| 规格: | 10rxns | 产品价格: | ¥50.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50rxns | 产品价格: | ¥200.0 |
产品优势:
- 质粒提取效率高,质量好;
- 高纯度,无RNA残留;
产品性能:
- 提取量高于市面竞品
将含5 kb,3 kb和2 kb不同质粒大小的DH5α菌株在LB培养基中培养至OD600≈2.5,分别用不同厂家的质粒提取试剂盒进行提取,每个样本为1 mL菌液,
最终质粒洗脱体积都为50 μL。启衡星提取的质粒浓度及产量高于其它厂家。

- 提取产物纯度高,无基因组及RNA污染。
将含5 kb,3 kb和2 kb不同质粒大小的DH5α菌株在LB培养基中培养至OD600≈2.5,分别用不同厂家的质粒提取试剂盒进行提取,每个样本为1 mL菌液,
质粒洗脱体积为50 μL。提取产物进行电泳,无基因组和RNA污染,纯度高。

产品组分:
| 组分名称 |
FS-B1702-S |
FS-B1702-01 |
储存温度 |
|
10 preps |
50 preps |
||
|
Resuspension Buffer (P1) |
2.5 mL |
12.5 mL |
RT |
|
Lysis Buffer (P2) |
2.5 mL |
12.5 mL |
RT |
|
Extraction Buffer(P3) |
2.5 mL |
12.5 mL |
RT |
|
DNA吸附柱 & 收集管 |
10 个 |
50个 |
RT |
|
RNase A |
50 μL |
250 μL |
RT |
|
Elution Buffer |
1 mL |
5 mL |
RT |
实验前准备:
自备试剂:异丙醇(Isopropanol)、75% 乙醇(Ethanol)。
操作步骤:
以下操作流程以OD600≤4的大肠杆菌培养液1~2 mL为例,若OD600过高或菌液量增加,可酌情增加试剂体积,但需要保证Resuspension Buffer、 Lysis Buffer和Extraction Buffer的比例不变,以免影响提取效果。
- 取1~2 mL细菌培养液置于离心管中,放入离心机于12000 rpm 离心2min或4000 rpm离心10 min,彻底弃去上清液。
- 将离心管从离心机中取出,加入250 μLResuspension Buffer(P1) 和5 μL RNase A,涡旋混匀至沉淀完全悬浮,溶液呈白色浑浊。
- 加入250 μL Lysis Buffer(P2),上下翻转颠倒数次,不要涡旋混匀,放置1 min(可观察破碎状态,若菌液浓度太高,可延长裂解时间至最长10 min)。
- 加入250 μLExtraction Buffer(P3),上下翻转颠倒数次,放置5 min。
- 4℃12000 rpm离心10 min或4000 rpm离心20 min,移取上清液约550 μL至干净的离心管备用,注意尽量避开上清液中可能残留的少量浮沫(浮沫过多可再次离心去除),移取时少量杂质残留会在后续步骤洗涤去除,不会影响产物纯度。
- 向步骤5中的离心管(含上清液)中,加入250 μL异丙醇涡旋混匀后,将液体转移支DNA吸附柱中(DNA吸附柱置于收集管中)室温静置孵育10min,
- 12,000 rpm离心1min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
- 加入600 μL75%乙醇,12,000 rpm离心 1 min,倒掉收集管中的废液。
- 重复步骤 8一次。
- 将吸附柱重新放回收集管中,12,000 rpm离心1min。 注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
- 将吸附柱置于一个新的收集管中,向吸附膜的中间部位加入50-100μL Elution Buffer,室温放置2-5分钟,12,000 rpm离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
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