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3α-羟基类固醇脱氢酶—9028-56-2

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  • ¥1965
  • 魏氏试剂
  • 3α-HSD
  • 湖北武汉
  • 2025年07月31日
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    • 英文名

      3α-HSD

    • CAS号

      9028-56-2

    • 保质期

      2年

    • 供应商

      魏氏试剂

    • 保存条件

      遮光、干燥、密封、阴凉处储存

    • 规格

      1瓶

    3α-羟基类固醇脱氢酶—9028-56-2

    中文:3α-羟基类固醇脱氢酶

    英文:3α-HSD

    CAS:9028-56-2

    分子式:E.C.1.1.1.50

    纯度:≥90%

    中文同义词:3α类固醇脱氢酶,3α羟基类固醇脱氢酶,3ALPHA-羟基类固醇脱氢酶,3a-羟基类固醇脱氢酶,3a-羟类固醇脱氢酶

    英文同义词:3α-HSD,3α-Hydroxysteroid Dehydrogenase,Dehydrogenase, 3a-hydroxy steroid,3alpha-Hydroxy steroid dehydrogenase

    技术指标

     

    外观:白色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性:≥25 U/mg酶粉;葡萄糖6磷酸脱氢酶:≤0.01%;乳酸脱氢酶:≤0.005%;谷氨酸脱氢酶:≤0.001%;苹果酸脱氢酶:≤0.01%;己糖激酶:≤0.01%

     

    酶学性质

     

    来源:微生物;分类:EC 1.1.1.50;分子量:30 kDa(SDS-PAGE);等电点:5.2;Km值:3.6×10-5 M(雄酮),4.7×10-5 M(NAD+);抑制剂:Cu2+,Ag+,Hg2+,Zn2+,Fe3+;最适pH:8.5-9.5;

     

    最适温度:55℃;pH稳定性:6.0-9.0(25℃,16 h);热稳定性:37℃以下稳定(pH 9.0,30 min);稳定性:-25~-15℃静置保存12个月保持90%以上活性;保护剂:BSA.

     

    用途:用于总胆汁酸(TBA)试剂的研发和大量制备。

     

    酶活定义:单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化生成1μmol NADH所需的酶量。

     

    试剂准备

     

    试剂I:0.1 M焦磷酸钠(用HCl调pH至8.9)。

     

    试剂II:将319 mg NAD+溶解至25 mL双蒸水中,用固体NaHCO3调节pH至7.0-7.5,用双蒸水定容至30 mL。

     

    试剂III:将30mg溶解至100mL甲醇中。

     

    酶稀释液:10mM Tris-HCl,pH 9.0。

     

    操作步骤

     

    1.向3 mL比色皿中依次加入2.6 mL试剂I,0.2 mL试剂II,0.1 mL试剂III,混匀。

     

    2.将反应混合物在25℃预热5 min。

     

    3.向反应混合物中加入0.1 mL酶液,混匀,

     

    25℃反应,并用分光光度计在340 nm下,记录1 min内的吸光度变化(ΔAs)

     

    *用酶稀释液替代酶液,其它步骤相同,所得溶液吸光度为空白吸光度(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb

     

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