超滤管，10kDa

10kDa 干扰素γ诱导蛋白（IP10）在牛生物样本中的精确检测实验

为了便于计算，尽管浓度为自变量而 O.D. 值为因变量，我们绘图时仍采用标准品的 O.D. 值作为横坐标 （X 轴），标准品的浓度为纵坐标 （Y 轴）。同时为了试验结果的直观性，图中提供的是原始数据而非对数值。推荐使用对数 值建立标准曲线图。由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和温度条件等），标准曲线的 O.D. 值会有所差异。所提供的标准曲线仅供参考，实验者需要根据自已的实验建立标准曲线。牛 10kDa 干扰素γ诱导蛋白 （IP10） 检测试剂盒标准曲线检测

干货：外泌体研究实操中的常见问题解答

体染色步骤中去除游离染料的第 4、5 步必不可少，以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌体，所有外泌体提取纯化方式都适用。 c、去除游离染料的方法推荐选择 3~10KD 的超滤管，利用其置换溶剂功能去除游离染料。具体步骤和实验参数请咨询超滤管厂商。 d、染料标记外泌体与细胞共孵育的培养条件尽可能使用无血清培养基，以提高细胞对染料标记外泌体的摄取效率，共孵育参考时长为 2 小时。 e、本染料也可用于细胞膜染色，参考剂量染料浓度为 2X10–6 M，细胞浓度为 1X107 cells

如何获得高质量的细胞上清液外泌体？

的复杂了，更不利于后期的研究了。 第三步初步浓缩（也可省略此步）：是不是在提取干细胞上清外泌体过程中会有看不到沉淀的时候？这时心中就没了谱，下游的检测项目做的更是提心吊胆。因此，在这里给出了通过超滤方法进行浓缩处理的建议。超滤的原理就是利用一定的尺寸大小的滤膜拦住大颗粒物而放过小颗粒物的原理，在离心管中最终呈现上液和下液，我们在根据实验目的各取所需。针对细胞上清液的特点，建议可以使用 10 KD ~ 100 KD 之间的超滤管来进行样品浓缩，外泌体通常是在超滤离心管的上室中，浓缩倍数控制到 5 倍