- ￥60
- 经科
- JK-502
- 国产
- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1ml
产品简介
蛋白酶K溶液（Proteinase K，10mg/ml）可直接用于消化各种蛋白以及应用于常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验，例如基因组DNA抽提、酶的消化去除等。
酶活力：含量≥30U/mg。有效的pH范围为pH4.0～12.5，最佳pH范围为pH7.5～8.0。蛋白酶K的反应温度为65℃，大于65℃蛋白酶K会迅速地降解，一般采用的反应温度为50～55℃。在0.2～1% SDS或约10mM尿素存在的情况下，蛋白酶K显示更高的酶活性
使用方法
1、 根据具体实验要求操作。
2、 一般工作浓度为0.05～1mg/ml。
保存条件
-20℃保存，有效期一年。
注意事项
1、 根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
2、 常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K活力影响不大。
3、 避免反复冻融，以免酶活力下降。
4、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验棕色小玻璃瓶，标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
，此时可见白色絮状沉淀，此即DNA粗制品。 5.用玻棒捞起DNA沉淀，放入小烧杯中，用70%乙醇洗涤沉淀一次，洗涤时动作要轻，防止DNA被切断。 6.沉淀取出放入一干净的塑料离心管中，用lmlTE缓冲液溶解。 7.在lmlDNA溶液中加入10mg/ml的RNA酶20μl，使最终浓度达到200μg/ml，37℃保温30分钟。 8.加入20%SDS25μl，使最终浓度至0.5%；加入0.5mol/l EDTA30μl至20mmol/l；加10mg/ml蛋白酶K20μl，使最终浓度为200μg/ml，50
%，70%，50%，30%各5min。入PBS（含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3～7.4）10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 （3）50℃2×SSC，含5mmol/l EDTA溶液中30min。 （4）蛋白酶K（1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中，）37℃20～25min。 （5）0.2mol/l 甘氨酸液：室温10min，中止蛋白酶反应。 （6）4%多聚甲醛（PBS新鲜配制）：室温20
NaCl、10mmol/l Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA(pH8.0)]，先少量，充分混匀，然后加10mg/ml蛋白酶K100μl，20%SDS30μl，摇匀，置37℃水浴15～20h。 （5）用等体积饱和酚抽提，3000rpm离心5min。 （6）用大口钝缘吸管小心吸取上层水相，加饱和酚和氯仿-异戊醇（24：1）抽提，3000rpm离心5min 。 （7）小心吸取上层水相，用等体积氯仿-异戊醇（24：1），抽提，3000rpm离心5min
技术资料