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- bio-093922
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- 2025年07月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 英文名：
Pichia guilliermondii
- 保质期：
15年
- 供应商：
北京百欧博伟生物技术有限公司
- 保存条件：
2-8度
原始编号:
原产国:中国
模式菌株:非模式菌株
主要用途:分类；研究；教学
特征特性:菌株为巴斯德毕赤酵母GS115，拉丁文名称Pichia pastoris。基因型为his-，属于MUT＋表现型，可以在含甲醇的培养基中快速生长，对外源基因表达有影响，但是也有利于翻译后加工，比如形成二硫键，糖基化等等。本菌株将ω3 基因开放阅读框插入组氨酸标记基因，ω3基因敲除。
具体用途:
生物危害程度:
培养基编号:14
培养温度:30℃
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文献和实验孵育10min。 6) 室温750g离心10min，小心抽吸PEG/CaT溶液，颠倒管，轻叩管壁以排出多余的PEG/CaT溶液。 7) 用150ulSOS培养基悬浮转化细胞，室温孵育20min。 8) 加入850ul1M山梨醇，接下来涂板。 2. 涂板：毕赤酵母去壁细胞需要铺在顶层琼脂糖或琼脂上，以防止在选择前被裂解 1) 接第8步，取100-300ul去壁细胞-DNA，与10ml融化的RD琼脂糖混匀倒于RDB平板
实验步骤 1. Mut 胞内或分泌表达：为检测表达条件是否有效，可培养GS115β-gal (Mut )(胞内表达-半乳糖苷酶)。亲代载体转化GS115 或KM71 作为胞内表达背景对照。 1) 挑取单克隆，接种至25mlMGY，BMG或BMGY中，(250ml摇瓶)，28-30度，250-300rpm摇至OD600=2-6(对数生长，大约16-18小时)。 2) 室温1500-3000g离心
、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统,其中酵母表达系统是最近发展起来的新型表达系统。最先使用的是酿酒酵母, 1981年Hitzeman等用酿酒酵母成功地表达了人干扰素,但该系统具有一定的局限性,缺乏强有力的启动子,分泌效率差,质粒不稳定等。因此,人们在此基础上又寻找了新的酵母表达系统———毕赤酵母,即甲醇营养型表达系统。 http://www.helixnet.cn/bbs/thread-13191-1-1.html 高效表达外源蛋白的方法 growth-associated方法（08.11.27
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