- ￥1355
- DOJINDO（东仁）
- L267-200tests
- 2026年03月19日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
详询
- 保质期：
详询
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
200tests
产品简介:
品牌：DOJINDO/东仁
货号：L267-200tests
产品名称：细胞脂质ROS检测—Lipid Peroxidation Probe -BDP 581/591 C11
特点：
● 高灵敏度脂质过氧化检测
● 适用于荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
产品概述
活性氧（ROS）是由双原子氧（O2）形成的高活性化学物质。近年来，据报道ROS与超氧化物反应导致脂质过氧化，这与细胞死亡和炎症等各种疾病有关。如上所述，ROS经历各种机制，因此，使用适当的试剂评估脂质过氧化水平很重要。
脂质过氧化探针BDP 581/591 C11是一种用于检测脂质过氧化物形成的荧光染料。Dojindo Laboratories（货号：L248）。Liperflo可以检测脂质过氧化物。与Liperflo不同，这种荧光染料不会对脂质过氧化物产生反应，但会与脂质过氧化过程中由高灵敏度的活性氧形成的脂质自由基发生反应。该探针的高灵敏度使其能够用荧光酶标仪进行检测，而Liperflo很难做到这一点，这使其成为荧光定量和筛选应用的试剂。
技术信息
脂质过氧化探针-BDP 581/591 C11是一种用于检测脂质过氧化的荧光探针。该荧光探针不与脂质过氧化物反应，而是与脂质过氧化时产生的脂质自由基反应，从而检测脂质过氧化。未反应的探针发出红色荧光，但在与脂质周围的自由基反应后，其荧光从红色变为绿色。由于是通过红色与绿色荧光强度的比率检测，所以具有更高的灵敏度。
脂质过氧化探针 -BDP 581/591 C11光谱
实验例1
用含有200µmol/l t-BHP的HBSS溶液刺激探针染色的HepG2细胞2小时，并将荧光强度与未处理细胞进行比较。结果，与未处理的细胞相比，在t-BHP处理的细胞中以高灵敏度观察到红色荧光的减少和绿色荧光的增加。使用荧光酶标仪检测细胞，并将获得的值计算为绿色/红色荧光的强度比，可以定量脂质过氧化。此外，当使用流式细胞仪检测细胞时，观察到绿色荧光值的增加。可以三种不同的仪器进行分析。
＜实验条件＞
Instrument: Fluorescent Microscope
Green: GFP filter (Ex = 450-490 nm, Em = 500-550 nm)
Red: TexasRed filter (Ex = 540-580 nm, Em = 600-660 nm)
Scale bar: 50 µm
＜实验条件＞
Instrument: Fluorescent Plate Reader
Green: Ex = 490 nm, Em = 520-540 nm
Red: Ex = 570 nm, Em = 600-620 nm
＜实验条件＞
Instrument: Flow Cytometer
Filter: FITC (Ex = 488 nm, Em = 515-545 nm)
实验例2
用含有200µmol/l氢过氧化枯 烯的HBSS溶液刺激用该探针染色的HepG2细胞2小时，并将荧光强度与对照细胞进行比较。结果显示，与未经处理的细胞相比，氢过氧化枯 烯处理的细胞中红色荧光减少，绿色荧光增加，表明可以检测到脂质过氧化。
＜实验条件＞
Instrument: Fluorescent Microscope
Green: GFP filter (Ex = 450-490 nm, Em = 500-550 nm)
Red: TexasRed filter (Ex = 540-580 nm, Em = 600-660 nm)
Scale bar: 50 µm
Q&A
| Q：试剂盒能检测多少样品？ |
|
A：请参考以下内容: |
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Q：是否有脂质过氧化试验的阳性对照？ |
|
A：用叔丁基 过氧 化氢（t-BHP）或枯 烯过氧化氢处理的HepG2细胞的检测实例。 （请参考实验案例1和实验案例2中的步骤1-5）。 |
|
Q：可以用缓冲液配制工作溶液吗？ |
|
A：不建议使用除说明书以外的缓冲液制备工作溶液。 |
|
Q：使用流式细胞仪检测时，应该在哪一步将细胞分离？ |
|
A：请遵循手册的步骤6，在用HBSS处理和洗涤后，用胰蛋白酶分离细胞 |
|
Q：染色后，我可以用其他缓冲液代替HBSS清洗细胞吗？ |
| A：可以使用PBS、Hanks的HEPES缓冲液和培养基清洗细胞 |
|
Q：配制工作液时，血清会产生影响吗？？ |
| A：根据实验使用的药物处理不同，血清的有无会对结果产生影响。因此，推荐使用无血清培养基进行配制。
实验案例 血清有影响（Erastin+R5L3处理）
＜实验条件＞ Green：Ex/Em488/500 - 550nm（2.0%，600V）； Red：Ex/Em 561/564 - 620nm（0.2%，500V）； Lens：×20
血清无影响（t-BHP处理）
＜实验条件＞
|
| Q：如何优化工作液的浓度？ |
|
最佳浓度取决于细胞类型。 请参考以下步骤。 ・准备多种浓度的工作溶液进行检测。 ・确定满足以下两个条件的最佳浓度 ➀S/N更清晰。 ➁染料聚集较少。 *如观察到染料发生聚集，请增加工作液稀释倍数可以显著缓解该情况
＜实验例：HepG2细胞最佳浓度的评价＞ 在用25µM Erastin+25µM RSL3处理24小时的HepG2细胞中检测了BDP 581/591 C11工作溶液的最佳浓度。 使用无血清MEM培养基稀释工作溶液。 ➀S/N更清晰
[检测条件] 绿色：Ex/Em 488/500-550nm（2.0%，600V） 红色：Ex/Em 561/564–620nm（0.2%，500V） 镜头：×20
➁染料聚集较少 在1000倍稀释时，在某些地方观察到染料聚集。 最佳浓度被确定为2000倍稀释，其S/N清晰，染料聚集较少。
|
参考文献
|
No. |
检测对象 |
检测仪器 |
引用(含链接) |
影响因子 |
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1 |
细胞 (HTR-8/Svneo) |
荧光显微镜 |
H. Yang, X. Zhang, Y. Ding, H. Xiong, S. Xiang, Y. Wang, H. Li, Z. Liu, J. He, Y. Tao, H. Yang, H. Qi, "Elabela: Negative Regulation of Ferroptosis in Trophoblasts via theFerritinophagyPathway Implicated in the Pathogenesis of Preeclampsia", cells, 2023, doi:10.3390/cells12010099. |
7.666 |
|
2 |
细胞 (HLE-B3) |
荧光显微镜 |
D. Ma, J. Liu, L. Wang, Z. Zhi, L. Luo, J. Zhao, Y. Qin, "GSK-3β-dependent Nrf2 antioxidant response modulates ferroptosis of lens epithelial cells in age-related cataract", 2023, doi:10.1016/j.freeradbiomed.2023.04.022. |
8.101 |
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文献和实验probe 4,4-difluoro-5-(4-phenyl-1,3-butadienyl)-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene-3-undecanoic acid, C11 BODIPY581/591 (BODIPY). ROS was detected by red fluorescence emission from oxidization of HE and membrane lipid peroxidation was detected by green
-BODIPY 581/591是细胞实验中常用的脂质过氧化探针。探针被氧化后，荧光由红色向绿色偏移，可通过流式细胞术或荧光显微镜检测。 使用时需要注意： 避免细胞密度差异过大； 设置未染色和单染对照； 各组保持相同染色时间、温度和探针浓度； 处理后尽快检测，减少探针继续氧化； 同时设置Ferrostatin-1或Liproxstatin-1挽救组。 图2｜C11-BODIPY检测脂质过氧化 但C11-BODIPY阳性仍不能单独定义铁死亡。它反映的是脂质氧化，需要与细胞死亡和功能性挽救实验结合。
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