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广州市左克生物
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100ml
货号:BB-3515-100ml
产品名称:二抗稀释液(Western)
品牌介绍
贝博生物 BestBio 致力于为中国广大客户提供量身定制的科研用试剂产品和专业技术服务,帮助科研人员加速生物领域的研究进展。并为实现这一理念提供优质的产品和服务。"
" 贝博生物致力于细胞分析、蛋白质生物学、外泌体研究、细胞组织染色等检测试剂盒的研发及相关衍生产品的开发,与国内外经验丰富的实验室开展合作,组成了技术力量强大的研发团队,制定了科学、严谨、高效的研发管理体系和标准化服务流程。
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文献和实验【原创】暗室实验(化学发光底物检测方法)及Western Blot实验优化方法
有多少种不同稀释浓度。通常,一种或两种一抗的稀 释度是用两种或三种不同的二抗稀释度进行测定的。例如:1/1000 的一抗和1/50000 的二抗;1/1000 的一抗和1/100000 的二抗;1/5000 的一抗和1/50000 的二抗;以及1/5000 和1/100000 的二抗。 3. 将膜放在滤纸上。将抗原稀释液点在膜上。用尽可能小量的稀释液点在膜上(2-5 ul 为宜),因为用的体积越大,信号越弥散。抗原溶液在膜上干10-30 分钟或直至无可见的水分。 4. 用含0.05
重要。1.转膜时间2. 转膜过程环境温度3. 转膜缓冲液使用次数4.转膜缓冲液中甲醇比例(v/v)(三)一抗使用*使用IRS1(150kDa)、pPERK(125kDa)和内质网应激XBP1(29/55kDa)抗体等检测小鼠肝组织探讨一抗在多种条件下对结果影响(IRS1,pPERK和 XBP1 用于 WB 检测难以出现清晰条带,因此选择合适的一抗及孵育条件就很关键)。1.一抗稀释溶剂2.一抗稀释比例3.一抗孵育时间(四)二抗使用*高浓度的二抗会导致大量非特异性结合,造成WB背景较深。1.二抗稀释比例 (洗释
使用寿命(抗体并非绝对不可以冻融;只是高浓度的原始管抗体的冻融对效价会有较大影响)。抗体稀释液(一抗、二抗稀释液也可同也可不同)和封闭液可以相同,可以不同,因为抗体稀释液可以采用复方的,所以即使混合了少许,不会对抗体的使用产生较大的影响。不过封闭液用milk时,gelatin稀释的一抗混入少许milk会影响其使用寿命。由于以上诸多可变因素,实在无法总结出一种万金油式的抗体稀释液(只能是多数通用),因此对待具体问题时,请具体对待(多花点心思摸索吧)。
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