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高铁还原酶（FCR）活性测定试剂盒

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  • ￥490
  • wksubio
  • WS7410F
  • 国内
  • 2026年06月22日
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    上海瓦兰生物科技有限公司
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    • 英文名：

      High iron reductase (FCR) activity assay kit

    • CAS号：

      WS7410F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    高铁还原酶（Ferric reductase,FCR）活性测定试剂盒说明书
    （货号：WS7410F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    高铁还原酶（Ferric reductase，FCR）催化高铁螯合物中的 Fe3+还原为 Fe2+，在部分物
    种铁元素的吸收中有重要作用。
    高铁还原酶（FCR）可以催化 Fe3+还原为 Fe2+，Fe2+再与亚铁嗪（ferrozine）生成紫红
    色化合物，该有色物质在 562nm 处有特征吸收峰，通过测定在 562nm 下的增加速率即
    可得出该酶活大小。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    粉体×2 支
    4℃保存
    用前甩几下或离心使粉剂落入底
    部，分别加1.1mL蒸馏水溶解备用。
    用不完的试剂分装后-20℃保存，禁
    止反复冻融，三天内用完。
    试剂二
    液体×2 支
    4℃保存
    试剂三
    粉体×1 支
    4℃保存
    临用前甩几下使粉体落入底部，再
    加 2.4mL 蒸馏水溶解备用。
    试剂四
    液体 25mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂五
    液体×1 支
    4℃保存
    标准品
    液体 1mL×1 支
    4℃保存
    三、所需仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、水浴锅或恒温培养
    箱、低温离心机、蒸馏水。
    四、高铁还原酶（FCR）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、 样本制备：
    ① 组织样本：
    取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm 离心 5min，取上
    清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
    ② 细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
    提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
    12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    ③ 液体样本：澄清的液体可直接检测；若浑浊则离心后取上清液检测。
    2、上机检测：
    ① 可见分光光度计预热 30min，设定波长到 562nm，蒸馏水调零。
    ② 所有试剂解冻至室温（25℃），在 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
    2
    【注】若△A 的值在零附近，可增加样本加样体积 V1（如增至 240μL，则试剂四相应减少）；
    或延长反应时间 T（如增至 60min）；或增加样本取样质量 W；则改变后的 V1、T 和 W
    需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线：y = 0.0249x - 0.0087：x 为标准品摩尔质量(nmoL)，y 为ΔA。
    2、按样本鲜重计算：
    单位定义：每克组织每分钟催化生成 1nmoL Fe2+定义为一个酶活单位（U）。
    FCR (nmoL/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0087)÷0.0249]÷(W×V1÷V)÷T=8.4×(ΔA+0.0087)÷W
    3、按样本蛋白浓度计算：
    单位定义：每毫克组织蛋白每分钟催化生成 1nmoL Fe2+定义为一个酶活单位（U）。
    FCR (nmoL/min/mg prot)=[(ΔA+0.0087)÷0.0249]÷(V1×Cpr)÷T=8.4×(ΔA+0.0087)÷Cpr
    4、按照液体体积计算：
    单位定义：每毫升液体每分钟催化生成 1nmoL Fe2+定义为一个酶活单位（U）。
    FCR (nmoL/min/mL)=[(ΔA+0.0087)÷0.0249]÷V1÷T=8.4×(ΔA+0.0087)÷Cpr
    V---加入提取液体积，1 mL；
    V1---加入样本体积，0.16mL；
    T---反应时间，30min；
    W---样本质量，g；
    500---细菌/细胞数量，万；
    Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
    附：标准曲线制作过程：
    1 标准品母液（15μmoL/mL）；把母液用蒸馏水稀释成以下浓度：0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16,
    0.2μmoL/mL。也可根据实际来调整浓度。
    2 40μL 标准品+10μL 试剂三+150μL 试剂四，混匀，室温静置 5min 后于 562nm 处读
    取吸光值 A，依据结果即可制作标准曲线。
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    样本
    160
    试剂一
    40
    试剂二
    40
    试剂三
    40
    试剂四
    480
    试剂五
    40
    充分混匀，于波长 562nm 处读取吸光值 A1，
    室温（25℃）孵育 30min 后读取 A2，
    △A=A2-A1。

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