一氧化dan(NO)（硝酸还原酶法）含量检测试剂盒产品图

一氧化dan(NO)（硝酸还原酶法）含量检测试剂盒

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  • ￥560
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  • WS2310F
  • 国内
  • 2026年09月14日
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    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 库存：

      大量

    • 英文名：

      Nitric Oxide (NO) Content Detection Kit (Nitrate Reductase Method)

    • CAS号：

      WS2310F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    一氧化*（NO）含量测定试剂盒说明书
    （货号：WS2310F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    一氧化*（NO）广泛分布于生物体内，作为细胞间及细胞内的信息物质，发挥信号传
    递的作用，是一种新型的生物信使分子，在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
    由于一氧化*（NO）本身极不稳定，在细胞内很快代谢为硝酸盐和亚硝酸盐，本试剂
    盒采用硝酸盐还原酶还原硝酸盐为亚硝酸盐，然后与改良的 Griess Reagent 反应生成在
    530nm 处有特征吸收峰的有色物质，通过测定其吸光值的变化即可计算出待检样本中总一
    氧化*（NO）含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    粉体×2 支
    -20℃保存
    用前甩几下或离心使粉剂落入底部，分别加
    1.5mL 蒸馏水溶解备用。用不完的试剂分装后
    -20℃保存，禁止反复冻融，三天内用完。
    试剂二
    液体 1mL×1 支
    -20℃保存 若一次性用不完，可分装保存，避免反复冻融。
    试剂三
    液体μL×2 支
    -20℃保存
    第一次开启前务必离心使微量液体落入底部
    （避免试剂浪费）
    ,若一次性用不完，可分装保
    存，避免反复冻融。
    试剂四
    粉体 mg×1 支
    -20℃保存
    临用前甩几下或离心使试剂落入底部，再加
    4.2mL 蒸馏水溶解。
    试剂五
    液体 12mL×1 瓶
    4℃保存
    临用前，可依据待检测样本数量，把试剂五和
    六按照等比例混合成无色的反应 mix（注意观
    察，若变粉色，则不能使用）。两天之内用完。
    试剂六
    液体 12mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    粉体×1 支
    4℃保存
    用天平称取 6.9mg 的标准品至一新 EP 管中，
    再加 1mL 蒸馏水溶解即 100μmol/mL，再用蒸
    馏水稀释 1000 倍即 0.1μmol/mL，现配现用。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、天平、研钵或匀浆器。
    四、一氧化*（NO）含量的测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备
    ① 组织样本：
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆，4℃×8000 rpm，离心 10min，取
    上清液沸水（95-100℃）5min 后，于 12000 rpm 再离心 5min 后取上清，上清置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
    ② 细胞/细菌样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液；
    超声波破碎细菌或细胞（冰浴，300W，超声 3s，间隔 7s，总时间 3min）；4℃×8000 rpm，
    离心 10min，取上清液沸水（95-100℃）5min 后，于 12000 rpm 再离心 5min 后取上清，本试剂盒仅供科研使用
    2
    上清置冰上待测。
    【注】:若增加样本量，按照细菌/细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    ③ 液体样本：若浑浊先离心取澄清上清液液体检测，若是澄清液体直接检测即可（尿液样
    本一般需做几个样本预测定，找出适合本批样本的稀释倍数 D）。
    2、上机检测：
    ① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 530nm，蒸馏水调零。
    ② 其余试剂于 37℃预热 5min。在 EP 管中依次加入：
    【注】1. 若△A 在零附近徘徊，可以增加样本取样量（如增加至 0.2g）。若 A 测定大于 1.5，可对样本用
    蒸馏水稀释，则改变后的样本质量 W 和稀释倍数 D 需代入计算公式重新计算。
    2. 若样本自身为较明显的红色或粉红色，可增设一个样本自身对照管：120μL 样本+150μL 蒸馏
    水+400μL 的反应 mix，混匀，37℃避光反应 15min，于 530nm 处读取吸光值 A，△A=A 测定
    -A 对照。
    3. 若加完反应 mix 出现浑浊沉淀（如血清样本），可于 5000rpm 室温离心 5min，测定管和空白
    管都取出全部上清液至 1mL 玻璃比色皿中于 530nm 处读取吸光值 A。
    五、结果计算：
    1、按样本质量计算：
    NO 含量(μmoL/g 鲜重)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×W)×D
    =0.1×△A÷(A 标准-A 空白)÷W×D
    2、按细胞/细菌数量计算：
    NO 含量(nmoL/104 cell)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×500)×D×103
    =0.2×△A÷(A 标准-A 空白)×D
    3、按液体体积计算：
    NO 含量(μmoL/mL)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =0.1×△A÷(A 标准-A 空白)×D
    C 标准---0.1μmol/mL；
    V---加入提取液体积，1mL；
    V1---反应中样品体积，0.12mL；
    W---样品质量，g；
    500---细胞数量，万；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1。
    试剂名称（μL）
    测定管
    标准管（做一次） 空白管（做一次）
    试剂一
    40
    40
    40
    试剂二
    20
    20
    20
    试剂三
    10
    10
    10
    样本
    120
    标准品
    120
    蒸馏水
    120
    混匀，37℃反应 60min
    试剂四
    80
    80
    80
    混匀，37℃反应 30min
    反应 mix
    400
    400
    400
    混匀，37℃避光反应 15min，全部上清液转移至 1mL 玻璃比色皿（光
    径 1cm）中，于 530nm 处读取吸光值 A，△A=A 测定-A 空白。

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