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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC1049H
- 2025年07月20日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
Kato III; Kato-III; KATO-III; KATOIII; KatoIII; KATO 3; JTC-28; Japanese Tissue Culture-28 |
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组织来源 |
胃；来源于转移部位:胸腔积液，锁骨上及腋窝淋巴结和道格拉斯氏陷凹 |
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疾病 |
胃癌 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代，悬浮部分离心收集(1000RPM,5分钟)，贴壁部分消化1-3分钟 |
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完全培养基配置 |
IMDM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
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简介 |
KATO III 细胞具有球形形态，是从一名 55 岁的亚洲男性胃癌患者的胸腔积液中体外建立的 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁，悬浮混合生长 |
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倍增时间 |
~36h |
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致瘤性 |
Yes, in cheek pouches of anti thymocyte serum treated hamsters. No, in nude mice. |
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STR |
Amelogenin: X CSF1PO: 7,11 D13S317: 8,12 D16S539: 10,12 D5S818: 10,11 D7S820: 8,12 TH01: 7,9 TPOX: 11 vWA: 14,16 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; HTB-103 |
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备注 |
该细胞为半悬浮和半贴壁细胞，悬浮细胞离心收集，贴壁细胞消化处理 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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是RNase失效，或效率不高。建议：1.更换RNase A，并保证其储存条件是正确的；2.对于手工提取质粒，可单独增加一步去处RNA的步骤 ，即溶液III反应后，离心的上清中加RNase，室温37度去RNA10min~30min，但需要保证你的RNase A是经过失活DNase的，同时较高温度（如50度）会更加快速完全的去除RNA，但本人经验，经过高温处理的质粒质量也不高。6. 传统手工大提质粒，使用PEG8000纯化的问题。 —— A. PEG8000不需要灭菌，当然，你要确认你的PEG8000是分子
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