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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 种属 | 人 |
| 别称 | CaPan-2; CAPAN-2; Capan 2; CAPAN 2; Capan2; CAPAN2 |
| 组织来源 | 胰腺 |
| 疾病 | 胰腺导管腺癌 |
| 传代比例/细胞消化 | 1:2传代.消化10-12分钟 |
| 完全培养基配置 | McCoy's 5A培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
| 简介 | Capan-2 是一种具有多边形形态的细胞系,于 1975 年从一名患有胰腺癌的 56 岁白人男性患者的胰腺中分离出来 |
| 形态 | 多边形 |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 倍增时间 | ~50-70h |
| 基因表达 | Blood Type B; Rh+; high levels of MUC-1 mucin mRNA; low levels of MUC-2 mRNA; MUC-3 gene not expressed |
| 致瘤性 | Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with pancreatic carcinoma |
| STR | Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 11,12 D16S539: 9,13 D5S818: 11,12 D7S820: 9,11 THO1: 9.3 TPOX: 8 vWA: 17 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
| 冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040 |
| 保藏机构 | ATCC; HTB-80 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
刚刚在中国科学院昆明细胞库看到他们今年最新公布的错误鉴定和交叉污染的细胞,共 60 个细胞系,STR 检测结果和备检细胞系的名称相差甚远,大家赶紧去看看自己的细胞是否在列吧。 很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行, 这些细胞可能是从细胞库 (如美国 ATCC,American Type Culture Collection) 得来,也可能是受赠于其它研究人员,尤其在中国,目前细胞的传播太复杂,无序,很多都不是通过正规途径获得,如友情赠送等。 据统计,约有 30% 细胞系被交叉
whm5869 我构建了一个质粒,包括目的基因片段和一小段启动子,测序结果完全正确,我们实验室的工作人员说理论上应该表达但是我转染细胞做WESTERN鉴定,就是不表达,请问这是为什么啊,谢谢各位大侠了 whm5869 我用的是polyjet转染试剂,操作等基本没问题,谢谢大家了 pharmaceutic 以前我站构建质粒的时候也遇到过这种问题,最后换了一个载体以后就表达了。最后分析认为不同
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