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文献和实验Transient transfection into 293T cells
Purpose Transient transfection into 293T cells is a convenient way to overexpress and obtain both cellular and extracellular (secreted or membrane) proteins. 293 is a human renal epithelial cell line which is transformed by adenovirus E1
关于293/293T细胞1、种属都为人,不是鼠。2、来源:293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形态为上皮细胞,能致瘤。4、染色体核型:亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30
Protocol for Production of Lentiviral Vectors in 293T cells
Day 1 Plating (9-10am) Plate 2-2.5x106 of 293T cells per 10cm plate Day 2 Transfection (9-10am) Prepare calcium-phosphate precipitate (1ml/10cm plate) Transfer vector - 20µg Packaging plasmid - 15µg (3rd generation: pMDL
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