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STRONTIUM FERRITE
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文献和实验尿素酶试验检测Hp 试剂 中通常加有一定量的缓冲成分,可以避免返流的胆汁及十二指肠液的影响[Am J Gastroenterol 1987;82:200],但会延长观察结果的时间,观察时间太短易出现假阳性[Lancet 1985;1:1443;1986;1:149]。我们研制的1min检测液中,不含有缓冲成份,从而使Hp尿素酶分解尿素导致的Hp变化能迅速被探知。本组1min法检测Hp的阳性率和特异性分别为97.8%和100%(以涂片法检查为标准),且符合简便、快速
1、变性温度和时间: 模板 DNA 和 PCR 产物的变性不充分是 PCR 失败的主要原因。适宜的变性条件是 95℃ 30s 或 97℃15s。变性不完全,DNA 双链会很快复性,因而减少产量。在变性中,温度太高或反应时间过长,会导致酶活性的损失。Taq DNA 聚合酶活性的半寿期:92.5℃为 2h 以上,95℃为 40min,97℃为 5min。 2、复性温度和时间: 复性温度决定 PCR 的特异性,而引物退火温度和所需时间长短取决于反应体系中的基本组成及扩增引物的长度和浓度,实际使用
的酶活也就越高。60℃ 酶反应速率很快,酶活最高,然而温度继续升高,胰酶的自水解加剧,酶活性损失加快。 把酶液分别放置在 4℃、15℃、25℃、30℃、40℃、50℃、60℃ 和 70℃ 水浴中温浴,每隔 20 min 检测残余酶活,得到 rPT 的热稳定性曲线,如图 2b 所示。4℃ 条件下 rPT 相对最稳定,2 小时内酶活残余率在 97% 以上;随着温度的升高,分子的结构发生了变化,分子间碰撞加剧,导致酶结构遭到破坏,rPT 的降解速率也随之加快。50℃ 条件下 2 小时内酶活残余
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