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- 详细信息
- 文献和实验
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100+
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上海维亦特生物
- 规格:
48T/96T
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文献和实验基因的表达。适当长度的5’非翻译区可极大地促进mRNA有效地翻译,5-UTR太长或太短都会造成核糖体40 S亚单位识别的障碍。AOX1基因5r-UTR长为1l4nt,并富含A+U,其编码的乙醇氧化酶表达量极高,故维持外源基因mRNA 5r-UTR尽可能和AoX1 mRNA 5-UTR相似是必需的,最好是保持两者一致。A+T含量高的基因在甲醇酵母中表达时,有时会造成转录提前终止,共有序列ATTATTTTATAAA就是一个转录提前终止信号。另外在A+T丰富区还存在一些没有确定的转录提前终止信号。因而对A+T
却表达良好。因此,可以通过调整高A+T含量区的核甘酸组成来避免提前终止的发生。而Sreekrishna等通过调整人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的mRNA5'非翻译区与醇氧化酶(alcohol oxidase 1,AOX1)的5'非翻译区相同后,HSA的表达量可以提高50倍以上。但遗憾的是,限于目前对Pp的了解程度,仍然无法预见某种外源蛋白是否能在其中获得高产甚至仅仅能否表达。至仅仅能否表达。 2、表达框的染色体整合位点和方式 虽然相对于自主复制载体来讲
酵母、甲醇酵母等,其中,甲醇酵母表达系统是目前应用最广泛的酵母表达系统。目前甲醇酵母主要有H Polymorpha,Candida Bodini,Pichia Pastris3种。以Pichia Pastoris应用最多。 甲醇酵母的表达载体为整合型质粒,载体中含有与酵母染色体中同源的序列,因而比较容易整合入酵母染色体中。大部分甲醇酵母的表达载体中都含有甲醇酵母醇氧化酶基因一1(A0x1),在该基因的启动子(PAXOI)作用下,外源基因得以表达。PAXOI是一个强启动子,在以葡萄糖或甘油为碳源时
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