植物ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)ELISA科研试

大肠杆菌glgC基因的克隆、序列分析与定点突变

: AGPase; E.coli ; glgC gene; PCR; sequence; site-directed mutagenesis 　　糖原是细菌细胞内碳源及能源的贮藏形式，其作用与淀粉在植物中的作用相同。糖原主要以ADPG途径合成[1]。AGPase （ADPglucose pyrophosphorylase, 腺苷酸二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶）是糖原合成中的关键酶[1～3]，它催化的反应为ATP＋G-1-P ADPG＋PPi。ADPG是葡萄糖的活化形式，它作为葡糖基的供体，使葡聚糖不断

【求助】cAMP的测定

和改进，由于这种方法采用放射性核素标记，应用范围受到一定限制，为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性，进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒，这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应，所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗，毫无疑问，兔多抗在约四十年的cAMP，cGMP定量检测中做出了巨大贡献，但同时它也有着明显的缺陷： 1，兔多抗对cAMP，cGMP的特异性不高，会

聚合酶链反应（PCR）技术的发展和应用

的Fc段结合的蛋白A。这样可特异地把生物素化的DNA分子和抗原-抗体复合物连接在一起。 　　选用BSA作抗原进行免疫PCR实验，结果表明，可检测出580个抗原分子（9.6×10-22 mol/L），而且可以完全避免其它非特异信号的干扰。与采用碱性磷酸酶的ELISA相比，其灵敏度可提高105 倍，较常规的放名分析灵敏度也高出几个数量级。 　　免疫PCR产物在普通的琼脂糖电泳上就可以检测出来，如用更好的方法来检测PCR产物，如放射性同位素，荧光物或酶等掺入到PCR产物中，可进一步提高其灵敏