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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | CT26.WT/LUC |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2202 |
| 中文名称: | 小鼠结肠癌细胞带荧光素酶 |
| 规格: | T25 |
| 组织来源: | 结肠 |
| 形态特征: | 上皮样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 特征特性: | CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)诱导形成的未分化结肠癌细胞株。 它克隆形成的细胞株命名为CT26.WT (ATCC CRL-2638)。 用包含编码典型肿瘤相关抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆转录病毒载体LXSN稳定转染CT26.WT,得到致死的亚克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)。 即使CT26.CL25表达了典型的TAA beta-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生长率与致死率也保持基本一致。 与CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)一起可用作测试免疫治疗程序的模型,并用于研究宿主免疫反应。 2001年七月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代通过BM 细胞周期蛋白处理21天消除支原体。 处理后六周,用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。 结果都呈阴性。 |
| 培养条件: | 1640+10%FBS |
| 传代方法: | 1:2传代 |
| 冻存条件: | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |






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文献和实验「少吃」可抑制肿瘤生长!复旦团队找到背后关键原因,补充双歧杆菌或有益处
性禁食(IF),可通过一种依赖于小鼠肠道菌群的机制来阻止皮下结肠癌细胞(MC38)的形成。 研究发现,卡路里限制饮食(CR)可以抑制肿瘤生长,但在使用抗生素耗竭肠道菌群的情况下,这种抑制作用就会减弱,而补充双歧杆菌可以恢复卡路里限制饮食的抗肿瘤作用,显著抑制原发肿瘤生长并减轻转移负担。机制上,双歧杆菌通过醋酸盐的产生介导 CR 诱导的抗肿瘤作用,这种作用也依赖于肿瘤微环境中 IFNγ+CD8+T 细胞的积累。 总之,卡路里限制饮食(CR)可以调节肠道菌群组成,其在肿瘤生长动力学和癌症免疫监测
了一些miR-95的靶基因,采用荧光素酶报告基因分析(luciferase reporter assay)发现,SNX1受miR-95抑制最为显著。而在SNX1的3'UTR区域引入突变之后,SNX1就不被抑制了。Western实验也显示,在结肠癌细胞中过表达miR-95,那么SNX1蛋白量降低;而抑制miR-95,SNX1蛋白含量则会升高。这些结果都表明:SNX1是miR-95的下游靶基因。 在结肠癌细胞中用siRNA抑制SNX1的表达能促进结肠癌细胞的增殖,这一现象和增加miR-95的表达量一致
,然后在适当的高度固定金属榛。用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧位,所以是研究中常采用的固定方法。 5.狗的抓取固定方法 未经训练用于急性实验的狗性凶恶,能咬人,因此进行实验时第一个步骤就是要绑住狗嘴。驯服的狗绑嘴时可从侧面靠近轻轻抚摸其颈背部皮毛,然后迅速用布带缚住其嘴。方法是用布带迅速兜住狗的下颌,绕到上颌打一个结,再绕回下颌下打第二结,然后将布带引至头后颈项部打第三个结,并多系一个活结(以备麻醉后解脱)。注意捆绑松紧度要适宜,倘若此举不成,应用狗头钳夹住其颈部,将狗按倒
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