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小鼠结肠癌细胞带荧光素酶

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  • SHC3864
  • 2025年07月16日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    产品名称:CT26.WT/LUC
    商品货号:SHC-2202
    中文名称:小鼠结肠癌细胞带荧光素酶
    规格:T25
    组织来源:结肠
    形态特征:上皮样
    生长特性:贴壁生长
    细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
    特征特性:CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)诱导形成的未分化结肠癌细胞株。 它克隆形成的细胞株命名为CT26.WT (ATCC CRL-2638)。 用包含编码典型肿瘤相关抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆转录病毒载体LXSN稳定转染CT26.WT,得到致死的亚克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)。 即使CT26.CL25表达了典型的TAA beta-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生长率与致死率也保持基本一致。 与CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)一起可用作测试免疫治疗程序的模型,并用于研究宿主免疫反应。 2001年七月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代通过BM 细胞周期蛋白处理21天消除支原体。 处理后六周,用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。 结果都呈阴性。
    培养条件:1640+10%FBS
    传代方法: 1:2传代
    冻存条件:无血清细胞冻存液
    细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    细胞复苏步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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