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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
小鼠肺上皮细胞-荧光素梅标记
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | TC-1-LUC |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2879 |
| 中文名称: | 小鼠肺上皮细胞-荧光素梅标记 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | RPMI-1640,FBS,P/S |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |








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文献和实验Sci Adv:中山大学柳夏林团队发现可有效治疗 GVHD 相关性干眼的新疗法
-exo 滴眼液后,角膜荧光素染色评分降低,泪液分泌量增高,干眼症状显著改善。 图:MSC-exo 滴眼液缓解 GVHD 小鼠的干眼 在组织病理上,研究人员发现 MSC-exo 滴眼液干预可以促进干眼小鼠角膜上皮层厚度的恢复,抑制了上皮细胞凋亡,促进其增殖;并且 MSC-exo 干预可以抑制巨噬细胞浸润角膜,降低炎症因子的表达。 图:MSC-exo 促进干眼角膜上皮的修复 进一步在机制上,通过荧光示踪标记技术,研究人员证明 MSC-exo 主要与角膜巨噬细胞共定位,并发现 MSC-exo 调控
除去大的组织碎片,30 μm ~40 μm孔径的滤膜除去全部Ⅱ型细胞和部分巨噬细胞[13],采用15μm的滤膜精滤。用滤膜分离操作简单,它和其他分离方法联合使用可以提高纯度。(3)流式细胞技术:流式细胞技术分离的原理是根据不同细胞之间的荧光差异。根据不同种细胞的特征识别,用荧光物质标记筛选。上皮细胞内含有丰富的脂类物质,用亲脂性荧光素标记,可以得到纯度很高的细胞。Funkhouser J D等用抗Ⅱ型上皮细胞的单抗进行免疫荧光标记,再用流式细胞仪进行筛选,得到96%的Ⅱ型上皮细胞[14]。但荧光素对被标记
],采用15μm的滤膜精滤。用滤膜分离操作简单,它和其他分离方法联合使用可以提高纯度。3、流式细胞技术:流式细胞技术分离的原理是根据不同细胞之间的荧光差异。根据不同种细胞的特征识别,用荧光物质标记筛选。上皮细胞内含有丰富的脂类物质,用亲脂性荧光素标记,可以得到纯度很高的细胞。Funkhouser J D等用抗Ⅱ型上皮细胞的单抗进行免疫荧光标记,再用流式细胞仪进行筛选,得到96%的Ⅱ型上皮细胞[14]。但荧光素对被标记细胞有害。Rochat T R等发现自然荧光和直角光散射可以区分巨噬细胞和单核
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