- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC3309
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
小鼠胚胎成纤维细胞，经射线处理，P3,100万细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | CF-1 MEFCF-1 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-3005 |
| 中文名称： | 小鼠胚胎成纤维细胞，经射线处理，P3,100万细胞 |
| 组织来源： | 小鼠，CF-1品系 取孕12.5天的CF-1小鼠的胚胎制备后经过射线处理 |
| 形态特征： | 成纤维细胞 |
| 特征特性： | CF-1 MEFCF-1小鼠胚胎成纤维细胞，经射线处理，P3,100万细胞描述 经射线处理的P3代饲养层细胞，每支细胞量1×106，供hES、mES使用。 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | 88%DMEM高糖+10%FBS+1%Glutamax+100×NEAA 1ml |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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文献和实验Nature 解读：David R. Liu 等通过体内碱基编辑实现治疗小鼠Hutchinson-Gilford早衰综合征
两个原发性成纤维细胞系 HGADFN167 和 HGADFN188，利用慢病毒转染将 ABE 导入细胞。实验结果显示，在转染后第 10 天时观察到了 84％和 85％的致病性突变得到校正，第 20 天时观察到了 87％和 91％的突变得到校正。并且研究者还观察到，与未经治疗的细胞相比，治疗 20 天后 ABE 慢病毒转导的 HGADFN167 和 HGADFN188 细胞中错误剪接的 LMNA mRNA 水平分别降低了 8.1 倍和 4.4 倍。ABE 处理还使早老素蛋白水平分别降低了 6.1 倍
利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞
视频以小鼠胚胎成纤维细胞为例，详细介绍了利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞的方法，如细胞的准备、仪器的设置及电转过程，并附上了转染后细胞的图像。0:00 利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞 0:44 内容简介 2:07 制备小鼠胚胎成纤维细胞 4:00 96孔电穿孔板 5:20 在96孔板上进行小鼠胚胎成纤维细胞电穿孔 7:49 在试管中进行小鼠胚胎成纤维细胞电穿孔 10:11 转染细胞落射荧光显微镜成像 12
采用四转录因子强力霉素诱导性慢病毒转导系统诱导小鼠胚胎成纤维细胞成多能干细胞
分析554 10:31 结论631 采用四转录因子强力霉素诱导性慢病毒转导系统诱导小鼠胚胎成纤维细胞成多能干细胞本视频来源于网络，如有异议请联系我们，我们将在5个工作日内作出处理。
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