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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
U-87 MG细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | U-87 MG |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-0187 |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 组织来源: | 星形胶质母细胞瘤;男性 |
| 细胞种属: | Homo sapiens, human |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 生长特性: | adherent |
| 培养基: | MEM+10% FBS+1% P/S |
| 形态特征: | epithelial |
| 传代方法: | 1:2-1:5 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞描述: | 这是1966年至1969年间J.Ponten和同事从恶性神经胶质瘤中构建的细胞株中的一株(其它包括ATCCHTB-15,ATCCHTB-16andATCCHTB-17)。1975九月消除了支原体污染。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | :待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存: | Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |








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文献和实验L-谷氨酰胺[2]。 图 1. U-87 MG 细胞低密度和高密度生长形态[3]。 注意事项: 1. 细胞贴壁能力较弱:消化时间短,严格把控时间 (细胞回缩、间隙变大且部分脱落时,加 2-3 mL 完全培养基终止消化);试剂需充分预热,避免室温放置过久。 2. 易聚集成团:胰酶充分消化并吹散,镜检确认单细胞状态;必要时用多聚赖氨酸包被培养器皿;避免密度过高、血清不适。 3. 血清要求高:选用高品质专用培养基及血清,保障生长速度与贴壁性。 4. 控制接种密度:传代
-3成功地扩增出Mg的281bpDNA片段,5个临床分离株扩增出同样的产生,而其他支原体和细菌均为阴性,用MgPa-2作探针,对扩增产物经Southern eP印迹杂交,均为阳性,证明引物具有特异性,共检出下降大约有50个Mg细胞。1993年Jensen等[17]又根据Mg粘膜蛋白基因设计了另一对引物,即: mg粘附蛋白基因设计了另一对引物,即: mgPa-476:5‘ATG GCG AGC CTA TCT TTG ATC CTT TAA 3’ mgPa-903
天然蛋白 周期长、技术要求高 表达产量低 七、生物学活性质控 不同的细胞因子用不同的方法进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。 重组细胞因子活性通常会以ED50(半数有效浓度)或units(活性单位)来标识。因此1mg细胞因子中所含的活性单位(units)可以理解为将1mg/ml细胞因子原液稀释成ED50的稀释倍数 注:ED50 (半数有效浓度): 可诱导50%最大反应的细胞因子浓度
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