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- 上海科梦达生物
- 上海
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- 2025年07月16日
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上海科梦达生物
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9001-99-4
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100mg
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文献和实验S1核糖核酸酶保护分析实验（S1 Nuclease Protection Assay）
相关专题 核糖核酸酶保护实验 S1 Nuclease Protection Assay End-label oligo (20-25 mer) 4 µl 5X T4 Kinase Buffer 5 µl [gamma-32P] ATP (7000 Ci/mmol) 10 µl water + oligo (200 ng) 1 µl T4 Kinase 1. 37
性地区别这两种发光报告基因的活力。萤火虫荧光素酶是一个61kDa单亚基蛋白质，酶活力不需翻译后修饰，在翻译后即可作为遗传报告基因。在ATP，Mg2+ 和 O2存在下，通过甲虫荧光素的氧化反应发光（图1）。在常规反应条件下，荧光素的氧化发生时，以荧光素-AMP作为中间体，转换非常缓慢。结果，在底物和酶混合后，测试化学产生“闪烁”的光，并迅速衰减。专利化的测试试剂，定量萤火虫荧光素酶活力，掺入了辅酶A（CoA）， 增强快速酶转换来提高反应动力学， 导致持续的“闪烁”发光信号 （图2） 。 图1 由萤火
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