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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Live or Dead™ Yeast Viability Assay Kit
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
100Tests
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Live or Dead 酵母活力检测试剂盒是一种可靠且稳定的检测方法，研究人员可以使用流式细胞术在数分钟内定量区分活酵母和死酵母。该试剂盒包含两种即用型核酸染料：MycoLight Green JJ98（SYTO 9 的替代品）和碘化丙啶。 MycoLight Green JJ98 是一种绿色荧光核酸染料，可标记所有酵母菌群 - 具有完整细胞膜的活酵母和具有受损细胞膜的死酵母。相比之下，碘化丙啶仅对细胞膜受损的死酵母染色。在两种染料都存在的死酵母中，由于碘化丙啶的 FRET，MycoLight Green JJ98 的荧光显着降低。结果，具有完整膜的活酵母将染成荧光绿色，而具有受损膜的死酵母将染成荧光红色。
样品分析方案
概述
准备酵母样品
添加 1 µL MycoLight Green JJ98 染料
添加 2 µL 碘化丙啶染料
轻轻涡旋，在 37°C 下孵育 15-30 分钟
使用 530/30 nm 和 576/26 nm 滤光片通过流式细胞仪进行分析
注：在打开小瓶之前，让组分升温至室温。碘化丙啶易与核酸结合，应将其视为潜在的诱变剂并小心处理。处理 DMSO 原液时应特别小心，因为已知 DMSO 有助于有机分子进入组织。
操作步骤
以下方案仅用作为参考使用，具体请根据自己的实验进行调整
1.以~ 106个细胞/ mL的浓度制备含1mL悬浮液的酵母样品。
2.在每管实验样品中加入 1 µL MycoLight™ Green JJ98（组分 A）和 2 µL 碘化丙啶（组分 B）。对于未染色的对照，将 1 组试管放在一边，不添加染料。对于单色 MycoLight™ Green JJ98 对照，将 1 µL MycoLight™ Green JJ98 添加到一管未经处理的细胞和一管死细胞中。对于单色碘化丙啶对照，将 1 μL 碘化丙啶添加到一管未经处理的细胞和一管死细胞中。请注意，根据您的具体应用，可能需要调整两种染料的比例以获得佳响应。
3.轻轻涡旋每个管。然后将所有样品在室温下孵育 15 至 30 分钟，避光。
4.使用配备 488 nm 激光、530/30 nm 过滤器和 575/26 nm 过滤器（FITC 和 PE 通道）的流式细胞仪检测荧光。
注意 要使用荧光显微镜分析样品，请在载玻片和盖玻片之间捕获 5 µL 染色酵母悬浮液。使用 FITC 和 Cy3 滤光片组在显微镜下观察。
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