活性氧 ROS Brite 700 体内成像优化

ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂，活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如：超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性，因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物，它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下（如紫外线照射或者高温环境下），ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害，日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ，如电磁辐射。在氧化应激条件下，活性氧产量大幅度增加， 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关，例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 700试剂是用以测量小动物氧化应激水平的新型荧光分子探针。 Th cell-impermeant ROS Brite 700试剂是水溶性的没有荧光，当其和活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。对于细胞活性氧应激水平检测，我们推荐您使用我们的 cell-permemeant ROS Brite 570, 670 and 780 试剂。，为您提供优质的ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 。 

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

样品操作及实验分析

1）在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中，制成5至10 µM的工作溶液。

2）根据需要处理细胞（例如，使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时）。

3）将细胞与ROS Brite （5-10 µM，来自步骤＃1）在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意：所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同，需要测试不同的浓度才能获得佳剂量。 对于cat＃16053，可能使用的浓度较低，例如0.5-5 uM。

4）用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5）用适当的荧光仪器（例如荧光显微镜，流式细胞仪或体内成像仪器）分析细胞。

 

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177--189

 

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