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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Amplite® Fluorimetric Formaldehyde Quantitation Kit *Green Fluorescence*
- 库存:
50
- 供应商:
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格:
200Tests
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。甲醛是自发产生的物质。上层大气中,可以自发贡献这个环境总甲醛的90%。生物体内很少遇到单体或者水合物甲醛。甲烷的生成通过等效量甲醛,但是在甲烷化时一碳物种被亚甲基类所掩饰。甲醛是甲醇毒性的原因,因为甲醇通过乙醇脱氢酶转变为甲醛。Amplite荧光法甲醛分析试剂盒 *绿色荧光* 利用专有的无荧光染料通过与甲醛反应产生强荧光。这个荧光试剂盒可以提供敏感的混合和读取的方法来检测甲醛。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。它的信号可以通过酶标仪在400/510nm处轻易地读取。,为您提供优质的Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 410nm |
| Em: | 525nm |
| cutoff: | 495nm |
| 推荐孔板: | 纯黑色孔板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备甲醛标准品和/或测试样品(50μL)
2.添加AldeLight 绿色工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育20至60分钟
4.监测Ex / Em = 410/525 nm处的荧光增加(截止= 495 nm)
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 AldeLight 绿色原液(500X):
将20μLDMSO(组分D)加入AldeLight Green(组分A)小瓶中,制成500X AldeLight Green原液。
1.2 甲醛标准溶液(123 mM):
将5μL37.2%甲醛标准品(组分C)加入0.5mL测定缓冲液(组分B)中,制成123mM甲醛标准溶液。
2.标准溶液
2.1醛标准溶液
将12.2μL123mM甲醛标准溶液加入0.5mL测定缓冲液(组分B)中,制成3mM甲醛标准溶液。 取3mM甲醛标准溶液,在测定缓冲液(组分B)中进行1:10,制成300μM甲醛标准品(FS7)。 取300μM甲醛标准品(FS7)并进行1:3连续稀释,得到连续稀释的甲醛标准品(FS6-FS1)和分析缓冲液(组分B)。
3.工作溶液
将10μL500XAldeLight Green原液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成AldeLight Green工作溶液。 注意:5 mL AldeLight Green工作溶液足以容纳1个板。 AldeLight 绿色工作溶液不稳定,好在2小时内使用。
样品分析
表1.固体背96孔微孔板中甲醛标准品和测试样品的布局。 FS =甲醛标准品(FS1-FS7,0.41至300μM),BL =空白对照,TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| FS1 | FS1 | ... | ... |
| FS2 | FS2 | ... | ... |
| FS3 | FS3 | ||
| FS4 | FS4 | ||
| FS5 | FS5 | ||
| FS6 | FS6 | ||
| FS7 | FS7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| FS1-FS7 | 50ul | 连续稀释液(0.41至300μM) |
| BL | 50ul | 分析缓冲液 |
| TS | 50ul | 测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局制备甲醛标准品(FS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。
2.向甲醛标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeLight Green工作溶液,使总甲醛测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLAldeLight Green工作溶液,总体积为50μL/孔。
3.在室温下孵育反应20至60分钟,避光。
4.用Ex / Em = 410 / 525nm(截止= 495nm)的荧光板读数器监测荧光增加。
参考文献
Biological Activity of Peptide-conjugated Polyion Complex Matrices Consisting of Alginate and Chitosan
Authors: Chikara Fujimori, Jun Kumai, Kyotaro Nakamura, Yingzi Gu, Fumihiko Katagiri, Kentaro Hozumi, Yamato Kikkawa, Motoyoshi Nomizu
Journal: Peptide Science (2016)
Hepatic Deficiency of Augmenter of Liver Regeneration Exacerbates Alcohol-Induced Liver Injury and Promotes Fibrosis in Mice
Authors: Sudhir Kumar, Jiang Wang, Richa Rani, Chandrashekhar R Gandhi
Journal: PloS one (2016): e0147864
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Journal: Biomaterials (2016): 12--26
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文献和实验Falck-Hillarp 甲醛诱发荧光法 去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、5―羟色胺、组胺等生物单胺类物质在组织内的含量甚微,需用高敏感性的技术方法才能在细胞水平显示。生物胺荧光组织化学是在诱发荧光的基础上建立的一种特异性强、敏感性高的技术方法。常用醛类诱发生物胺荧光的方法有Falck-Hillarp甲醛诱发荧光法、乙醛酸诱发生物单胺类荧光以及邻苯二醛诱发组织胺荧光法。 该法主要用于显示儿茶酚胺(catecholamine,CA),如去甲肾上腺素、多巴胺及5―羟色胺
核为亮蓝色荧光。 荧光免疫细胞化学染色 原代培养胚胎14天大鼠端脑细胞,波形蛋白免疫反应阳性细胞呈绿色荧光(FITC标记二抗) 注意事项: ①如标本为甲醛固定的组织切片,需增加抗原修复步骤; ②对于易脱片的细胞样品在固定后增加晾干时间,可起到防脱片的作用; ③如果结果分析显示有非特异性染色,则需在正常血清封闭之后再用5%牛血清白蛋白封闭。 2.检测抗体法 (1)切片或涂片固定后,置于染色湿盒内,滴加未标记的特异性抗原于标本表面,37℃孵育30分钟,PBS漂洗2次
色,或核呈分叶状,边集的Hoechst着色的为调亡细胞。我最近在作的试验就是用的这种方法,附上一张我染的PC12细胞的图片,请大家指教。更精确的定量可以通过流式细胞仪来检测。用PI和Hoechst33342双标鉴别调亡、坏死,这种方法简便易行,结果比较可靠。 2、PI和Calcein-Am双标: Calcein-AM 是一种绿色荧光标记物,可显示胞浆,为膜通透性的荧光染料。Calcein-AM 一旦进入胞内,便可被内源性酯酶水解成绿色荧光物质calcein, 并保留在胞浆中。细胞
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