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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
广州市左克生物科技发展有限公司
- 运输方式:
干冰
- 规格:
50×50ul
产品线有:克隆 热激 感受态细胞、 克隆 电击 感受态细胞、 表达 热激 感受态细胞、 发根 农杆菌 化转 感受态细胞、 发根 农杆菌 电击 感受态细胞、 农杆菌 化转 感受态细胞、 农杆菌 电击 感受态细胞、 酵母 感受态细胞
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文献和实验1.5ml缓冲液B,彻底混匀; 30℃水浴孵育1h; 室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中; 离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中; 将所有转化液铺于选择性平板,于30℃孵育3~4天后,鉴定; 3、毕氏酵母电转化法 (1)E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液,接种于200ml LB液体培养基中活化培养,37℃,200 rpm,16~18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB
取出离心管,加入1.5ml缓冲液B,彻底混匀; 30℃水浴孵育1h; 室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中; 离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中; 将所有转化液铺于选择性平板,于30℃孵育3~4天后,鉴定; 3、毕氏酵母电转化法 (1)E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液,接种于200ml LB液体培养基中
方法一 A液:1M,MnCl2: B液:1M,HEPES,pH=6.2-6.8,用无菌水配,配后不需灭菌; C液 称取CaCl2 0.10g,KCl 1.18g,全部转入细口试剂瓶,然后加入46ml三蒸水,轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎,然后放入灭菌锅121℃高压灭菌备用。取1管B液(0.6ml),全部加入C液(46ml)中,混匀后,再用1ml移液器加入3.3ml A液,混匀冰浴即可使用。 划线得到单菌落,37℃培养箱培养约17小时
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