L3000008赛默飞Lipofectamine 3000转

Invitrogen转染试剂盒系统的选择

，Lipofectamine® LTX试剂不能用于小分子RNA的转染，这一点与L2K可不同。因此，在选择质粒与RNA的共转染试剂时，还须选择L2K。 还有一个好消息!以往，Invitrogen的转染试剂只有0.75 ml/1 ml的包装。对于某些不经常做转染，或者只想试一下的客户来说，这个包装太大了，于是他们便改投了Fugene的怀抱。Invitrogen当然也意识到了这个问题，不久前推出了0.1 ml的Lipofectamine® LTX & PLUS小包装，价格约为528元。常规的1 ml包装则为4800

Invitrogen的王牌：Lipofectamine 2000转染试剂

消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。 对于每孔细胞，使用50μl无血清培养基(如OPTI-MEMⅠ培养基)稀释0.8μg-1.0μg DNA。 对于每孔细胞，使用50μl OPTI-MEMⅠ培养基稀释1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000试剂。Lipofectamine 2000稀释后保温5分钟(在30分钟内同稀释的DNA混合。保温时间过长会降低活性。) 注意：即使Lipofectamine

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。2)若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA，则弃下层酚相。7．按0.5ml异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀，室温放置5-10min。8．4℃ 12000g离心10min，弃上清，RNA沉于管底。9．按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。10．4℃ 8000g离心5min，尽量弃上清。11．室温晾干或真空干燥5-10min。 注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。12．可用50ul H2O，TE buffer或0.5%SDS