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- 奕杉
- ES0016
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 规格：
100ml
产品简介
无血清细胞冻存液是限定化学成分的细胞冻存液，不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。通用于各种哺乳动物细胞株（肿瘤细胞和常规细胞）；既适用于基础培养基添加血清的常规方式培养细胞的冻存，也适用于无血清条件下培养细胞冻存，冻存细胞可在-80℃长期保存。
产品优势
- 即用型，操作简单，直接低温冻存；
- 不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全；
- 细胞存活率和活力高，批次间稳定；
- 告别程序降温；
- 低温冰箱直接冻存；
- 无需氮液可长期保存；
细胞冻存
1. 收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于离心管内；
2. 对细胞进行计数，计算细胞密度，对于贴壁细胞建议冻存密度为1~5×106cells/ml；对于悬浮细胞建议冻存密度0.5~2 ×107cells/mL；
3.将所需数目的细胞悬浮液加入到离心管内，1000rpm/5min离心后，弃尽离心管内的上清；
4. 加入对应体积预冷的细胞冻存液于离心管内，轻柔地吹打混匀细胞，制成单细胞悬液；
5. 将离心管中的细胞悬液分装于已标记的冻存管中，建议每管冻存1ml；
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。
细胞复苏步骤
1. 从-80℃冰箱中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴槽中快速解冻；
2. 待冻存管中细胞混合液剩一小块冰晶后，将细胞混合液吸取至含有约5ml该细胞完全培养基的离心管内，1000rpm/5min离心后，弃去上清液；
3. 加入适量的新鲜细胞完全培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，轻柔地吹打细胞，将细胞悬液转移至培养皿(瓶)中。
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文献和实验一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的，去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体，而外泌体专用无血清培养基，也不是适合所有的细胞，常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，所以也需要一些预实验的摸索。 还有，那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢？这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下，是处于饥饿状态的，细胞会将培养
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
高，湿度大，各位小伙伴们辛苦做实验的同时，一定记得按照规范操作和保存实验用品，注重实验室通风和安全哦~1 Wshtbio 蛋白电泳预制胶这是一款美国 EZBiolab 公司开发高性能超低成本聚丙烯酰胺预制凝胶，专利凝胶和缓冲液配方，分辨率高，条带清晰，电泳效果极佳。胶夹打开轻松，电泳时间短，40-50 分钟即可完成。兼容市场上主流的 mini 电泳槽， 凝胶中不含 SDS，可用于变性及非变性电泳。2 NCM Biotech 无血清细胞冻存液CELLSAVING® 是一种即用型无血清细胞冻存液，通
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