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1864052
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文献和实验的参考基因作为内部扩增对照,并将不同样品之间的浓度差异归一化 4. 尽量减少DNA溶液中的EDTA浓度,因为EDTA可能干扰下游反应中一些酶的活性 HRM兼容的饱和染料 HRM分析依靠的是分析熔解动力学中细微变化的能力,它通常需要一种饱和染料(图1)。这些染料对PCR的抑制比SYBR Green I染料要低,因此可使用更高的浓度,以便一致地区分PCR扩增的DNA。目前有多种染料可供选择,最常用的是EvaGreen®、LCGreen、SYBR® GreenER™
), PCR仪 My Cycler (Bio-RAD),Direct-Pure UP 超纯水系统(RephiLe),核酸电泳仪 EPS100 (上海天能)。细菌基因组 DNA 提取试剂盒(Axygen),dNTP (Takara)三、试验方法1. 样品制备和增菌培养 接种前,先将增菌培养基煮沸 10 ~ 15 min,以排除溶解于培养基中的氧,并迅速冷却,切勿摇动。每 15 ml 增菌肉汤中接种 1 ~ 2 g 固体食品或 1 ~2 ml 液体食品,接种时将接种物慢慢接入肉汤液面以下。每份样品接种
【共享】很有用的MIRNA(microRNA)检测实验流程(加polyA法)
、快捷、节约:miRNA qPCR Detection System是基于SYBR Green染料法的qPCR检测系统,可用于从一个合成反应的cDNA中检测多种miRNAs,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量 。 检测的特异性:独特的miRNA引物设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-miRNA的污染 检测分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的miRNA 一站式解决方案:GeneCopoeia 不仅提供检测的试剂盒,还提供经验证的人源、小鼠源、大鼠源的特异
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