Biogems 10X透化缓冲液

Biogems 10X透化缓冲液

 

简要描述：

产品名称：Biogems 10X透化缓冲液

产品货号: 92110-00-150

英文名称：Permeabilization Buffer (10X)

产品规格：150ml

产品简介：

Permeabilization Buffer 渗透缓冲液可作破膜剂可用于胞浆和核抗原的胞内染色。缓冲液在整个染色过程中维持细胞的渗透性。其目的是减少背景非特异性染色，增加特异性荧光信号。10倍浓缩液应在使用前用蒸馏水稀释至1倍。

产品使用说明：

1. 将渗透缓冲液(cat# 92110-00)稀释10倍，生成新的工作溶液用蒸馏水浓缩至1x。每个样品大约需要8.5 mL的工作溶液

2. 通过稀释生成转录因子固定/渗透缓冲液的新鲜工作溶液

1份浓缩液(cat# 92550-00)和3份稀释剂(cat# 92160-00)。1毫升的每个样品都需要工作解决方案。

3.安排感兴趣的细胞样本进行流式细胞术分析。

4. 可选地，利用相关活性染料从分析中排除死亡细胞。

5. 利用结合抗体对感兴趣的细胞表面标记物进行染色。

6. 洗净颗粒，弃去上清液。

7. 将样品置于脉冲涡流中，使颗粒分离。

8. 在每个样品中加入1ml转录因子固定/渗透工作液脉冲涡流。

9. 样品在4°C或室温下孵育至少30分钟。

10. 对每个样品，加入2mL的1x渗透工作溶液。

11. 室温下300-400xg离心5分钟。

12. 弃掉上清，可重复步骤10-12。

13. 将微球重悬于1x渗透缓冲液约100µL的剩余体积中。

14. 将具有细胞内抗原特异性的偶联抗体添加到样品中。

15. 将样品置于室温黑暗中培养30分钟。

16. 对每个样品，加入2mL的1x渗透工作溶液。

17. 室温下300-400xg离心5分钟。

18. 弃掉上清，重复步骤16-18。

19. 将样品重新悬浮在适当的缓冲液中，以用于流式细胞术分析。

产品应用：

BioGems支持缓冲液可用于同时研究细胞表面和细胞内抗原。

转录因子固定/渗透溶液可与相关抗体一起染色

转录因子如Foxp3和细胞因子、趋化因子和核蛋白的核内染色。