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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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999
- 供应商:
苏州方舟生物科技有限公司
- 英文名:
Hematopoietic Stem Cell Serum-Free Expansion Culture Kit
产品描述
人体造血干细胞无血清扩增培养试剂盒是一款专为高效扩增造血干细胞(HSC)而开发的细胞培养产品,对脐带血、骨髓、动员外周血来源的 HSC 均适用。本产品添加高质量的细胞生长因子和营养补充剂,在不引入外源性基因表达和无饲养层细胞的条件下,支持 HSC 的体外高效扩增和功能维持。扩增后的 HSC 在功能上维持了长期自我更新能力和分化潜能。
产品优势
- 无需添加血清,避免潜在病原体传播和异种血清所带来的异源性污染
- 添加细胞生长因子和营养补充剂,保证 HSC 的体外高效扩增
- 适用于多种组织来源的 HSC 的培养,如人脐带血、骨髓、动员外周血来源 HSC 的原代分离和后续扩增传代培养
- 扩增后的 HSC 具有长期造血重建能力和向髓系、淋巴系细胞分化的潜能
产品信息

使用方法
【培养基的配制】
1. 在 4℃解冻营养添加剂、造血干细胞扩增添加剂和造血干细胞分化抑制剂,使用前请务必进行离心操作。
2. 在无菌生物安全柜中,将营养添加剂以 1%的比例,造血干细胞扩增添加剂和造血干细胞分化抑制剂以 0.1%的比例加入到 HSC 扩增基础培养基中,充
分混匀,得到 HSC 扩增培养基。
【细胞培养】
1. 将 HSC 密度调整为 1×105 个细胞/mL 接种,置于细胞培养箱,37℃,5% CO2,静置培养。
2. D3:进行细胞计数,使用 HSC 扩增培养基将 HSC 密度调整为 1×105个细胞/mL,传代后继续培养。
3. D6:同步骤 2。
4. D7-D9:轻轻吹打细胞,收集悬浮细胞,即为扩增的 HSC,可进行后续操作和分析。
【注意事项】
- 如每次使用剂量较少,可将本产品各组分分装后按照给定的储存条件保存,避免反复冻融。
- 配置好的培养基可置于 4℃保存,保存期限不超过 2 周。
- 培养过程中,如在推荐传代时间细胞量过多或过少,可适当缩短或延长传代时间。
- 本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
参考文献
[1] Zhang Y , Shen B , ,et al.Safety and efficacy of ex vivo expanded CD34+ stemcells in murine and primate models[J].Stem Cell Research & Therapy, 2019, 10(1).
[2] 蒋永平,王兰,关欣.促进造血干细胞扩增并抑制其分化的化合物及细胞因子组合物.2018.
[3] 蒋永平.高效离体人造血干细胞扩增培养液配方:CN201410066574.9[P].CN201410066574.9
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文献和实验【摘要】 目的 比较无血清培养基(AIMV)与完全培养基(CM)体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法 分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果 与完全培养基比较,无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14~17天),但增殖倍数高
细胞来说要少很多。 最后,针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题,这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话,那就使用超速离心的方法,按照前文建议的预处理操作后,超离后的沉淀也会增加的,同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下,也可以通过试剂盒的方法来提取,除了进口品牌外,也可以使用一些国产试剂盒,质量也不亚于进口品牌的。 总结一下,为了获得高质量的外泌体:需要在细胞培养时减少正常血清的使用,推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基;收获
。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
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