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99
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北京云肽生物科技有限公司
G-Biosciences HOOK琼脂糖偶联试剂盒
产品名称:G-Biosciences HOOK琼脂糖偶联试剂盒
产品货号: 786-063
产品规格:5 Columns
产品品牌:G-biosciences
产品简介:
研究中的一个重要工具是生成用于纯化抗体和发现重要的相互作用蛋白质和辅因子的肽和蛋白质亲和柱。G-Biosciences 提供完整的试剂盒,用于通过伯胺将肽和蛋白质偶联到琼脂糖上。这些试剂盒包含产生稳定键的所有试剂,从而使色谱柱可以重复使用多次。
胺反应性 HOOK ™琼脂糖偶联试剂盒设计用于将蛋白质和肽简单有效地偶联到固体支持物上。该试剂盒可以生成稳定且可重复使用的色谱柱,用于抗体、蛋白质和其他蛋白质相互作用生物分子的亲和纯化。
该试剂盒使用我们的 HOOK ™活性琼脂糖(胺),该琼脂糖具有反应性醛基。琼脂糖的醛基与位于蛋白质 N 端或赖氨酸残基中的伯胺自发反应,形成中间席夫碱复合物。这些反过来又被提供的还原剂选择性地还原。反应淬灭后,蛋白质或肽通过稳定的胺键连接到琼脂糖上。现在可以将树脂分装到随附的色谱柱中,用于纯化和相互作用研究。
除了所有偶联试剂外,HOOK ™ Agarose Coupling Kit 还提供特定的 Optimizer Buffer ™,可提供最佳偶联条件并可用于平衡您的起始蛋白质样品。
产品特征:
用于通过胺基将蛋白质偶联到琼脂糖树脂上。
提供所需的所有试剂和色谱柱。
产品应用:
生成可重复使用的蛋白质和肽柱。
蛋白质和肽与琼脂糖珠的偶联。
适用于抗体纯化。
发现新的相互作用蛋白。
运输与储存:
该套件在环境温度下运输。到达后5X Optimizer BufferVI和HOOK活化琼脂糖浆(胺反应)在4°C,NaCNBH3在室温(RT)下干燥,所有其他部件在室温下干燥。如果储存和使用得当,该试剂盒可稳定使用一年。
产品组分:
5X Optimizer Buffer VI 2 x 25ml
Sodium Cyanoborohydride (NaCNBH3) [5M] 0.5ml
HOOK Activated Agarose slurry (Amine reactive) 20ml
Empty Disposable Columns (Part# 069E-B) 5
Quenching Buffer (3M) 25ml
产品使用说明:
使用前准备
准备1X优化缓冲VI (1ml 5X优化缓冲VI在4ml去离子水)。
标准协议使用35ml 1X Optimizer BufferVI。
注意:
1.不应使用含胺的缓冲液,Tris或甘-氨酸。如果蛋白质在含胺缓冲液,然后对1X优化缓冲液VI进行透析
2.所有缓冲液的pH值应大于7.0,以防止
释放有毒气体。不要酸化溶液。
警告:部分成分有毒,使用请通风。
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文献和实验Qiagen公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒:MinElute Gel Extraction Kit 品牌:Qiagen回收范围:70bp-4kb价格:(50包装1,485,约29元/反应)特点:洗涤体积只要10μl,回收产物浓度高,方便后继实验使用方便快捷(wash-and-spin)高回收率回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外转录等后继实验使用心得:如果要回收片断量本来就很少,比如只有几十个ng,用常规的试剂盒洗脱得到将近50ul的产物
心得:这一款胶回收试剂盒不同于之前提到的凝胶回收方法——Montage利用的是从凝胶中抽取(compression)DNA片段的方法:通过离心力解离凝胶的结构,驱使琼脂糖在gel nebulizer中穿过小孔,这样形成的胶泥就被甩进样品过滤盖中。因此无需其它多余的操作,直接将切下来的凝胶放进去,经过5000g/10min,即可得到回收DNA片段(见下)。 回收率见下:Typical DNA Recoveries from Agarose GelsDNA Size (bp)Percent DNA
,驱使琼脂糖在gel nebulizer中穿过小孔,这样形成的胶泥就被甩进样品过滤盖中。因此无需其它多余的操作,直接将切下来的凝胶放进去,经过5000g/10min,即可得到回收DNA片段(见下)。 回收率见下: cellSpacing=1 cellPadding=0 width=300 border=0> cellSpacing=0 cellPadding=3 width="100%" border=0> Typical DNA Recoveries
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