BD Pharmingen Stain Buffer (FB

BD Pharmingen Stain Buffer (FBS)缓冲液

简要描述：

产品名称：BD Pharmingen Stain Buffer (FBS)缓冲液

产品货号: 554656

产品规格：500mL

产品简介：

BD Pharmingen stain buffer染色缓冲液(FBS)可用于淋巴组织、外周血或培养细胞制备的单细胞悬液的免疫荧光染色。染色缓冲液(FBS)对荧光试剂的稀释和应用以及用于流式细胞仪分析的细胞的悬浮液、洗涤和存储都是有用的。基于之前对染色培养基的报道，染色缓冲液(FBS)被配制成中性pH (pH 7.4)缓冲盐溶液(即DPBS)，其中添加了热灭活(56°C, 30分钟)胎牛血清(FBS)蛋白。因此，染色缓冲液(FBS)旨在维持细胞活力，并 限度地提高ph敏感荧光色素产生的荧光信号强度。此外，染色缓冲液(FBS)含有代谢抑制剂。NaN3抑制抗体交联引起的细胞表面抗原的潜在再分配。因此，在后续的流式细胞术分析中，NaN3(与维持低温环境温度相结合)可以防止免疫荧光染色细胞产生的荧光信号强度的潜在损失。

推荐的实验流程：

1. 使用标准方案从淋巴组织、gu sui、外周血或细胞培养中制备单细胞悬液。

2. 在冷染色缓冲液(FBS)中洗涤细胞两次，并通过离心将细胞制成颗粒。用冷染色缓冲液(FBS)重悬细胞颗粒至最终浓度为2 × 10e7 cells/ml。

3.将50μl等量的细胞悬液(10e6细胞)分配到试管或微孔板的圆底孔中。

4. 在染色缓冲液(FBS)中稀释荧光抗体至预定的 浓度，并将少量稀释抗体(如10μl)加入含有目标细胞悬液的试管或微孔中。在避光冰上孵育20分钟。染色时间可能增加(≥45分钟)取决于荧光抗体的热情。

5. 用200μl(微孔板)或1ml(试管)染色缓冲液(FBS)洗涤细胞两次，以去除未结合的抗体。细胞以300 x g离心5分钟。每次离心后，小心地抽吸(用于微孔板或试管)或倒置并吸走(用于试管)细胞颗粒上清。