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逆转录酶(reverse transcriptase)PER

T荧光定量探针法PCR检测试剂盒
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  • 上海科梦达生物
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      上海科梦达生物

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    上海科梦达生物主营:动物血清血浆全血,各种浓度红细胞,ELISA试剂盒,生化试剂盒,PCR试剂盒,胎牛血清(Gibco/BI/Gemini/PAN等),细胞(细胞系,原代细胞),培养基,各类抗原,抗体,抗血清,感受态细胞,考马斯亮蓝蛋白快速染液等,液相检测, 气相检测 ,液质联用检测 ,常规生理生化测定,土壤检测,elisa检测服务(购买本公司ELISA试剂盒免费代测)

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      的动态范围或线性度最佳,可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率,以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验,可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成

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         又称 RNA指导的 DNA聚合酶。是以 RNA为模板合成 DNA的酶。这种酶是 1970年美国科学家特明( H.M.Temin)和巴尔的摩( D.Baltimore)分别于动物致癌 RNA病毒中发现的,他们并因此获得 1975年度诺贝尔生理学或医学奖。当 RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒( Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒 RNA互补的 DNA单链,继而复制出双螺旋 DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色

    • 荧光定量 PCR——想要实验结果可靠,各种对照不可少

      ,此时则需要通过优化引物的设计来减少引物二聚体对结果的影响。 无逆转录酶对照 No Reverse-Transcriptase Control, No RT 当进行 RNA 定量实验时,如果引物和探针设计在同一个外显子上,就无法从结果中判断扩增是否来源于未去除干净的 DNA,从而影响定量结果的准确性。除了在引物和探针设计上面下功夫,还可以设置无逆转录酶对照。即在逆转录实验时,不加逆转录酶,并进行后续的定量 PCR 检测。无逆转录对照中由于没有 cDNA,DNA 聚合酶无法扩增 mRNA,则不应

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