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- 上海科梦达生物
- v15514760315
- K2346
- 2025年09月18日
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- 文献和实验
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- 适应物种：
参考说明书
- 标记物：
2-8℃/-20℃
- 样本：
上海科梦达生物
- 规格：
100毫升
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上海科梦达生物主营：动物血清血浆全血，各种浓度红细胞，ELISA试剂盒，生化试剂盒，PCR试剂盒，胎牛血清（Gibco/BI/Gemini/PAN等），细胞（细胞系，原代细胞），培养基，各类抗原，抗体，抗血清，感受态细胞，考马斯亮蓝蛋白快速染液等，液相检测， 气相检测 ，液质联用检测 ，常规生理生化测定，土壤检测，elisa检测服务（购买本公司ELISA试剂盒免费代测）
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文献和实验酵母细胞。 3. 构建DNA-BD/靶蛋白质粒pLexA-X，作为钓饵(bait)。 4. 将上述钓饵质粒pLexA-X转化EGY48(p8op-LacZ)细胞株，用SD/-His/-Ura筛选;并用固体诱导培养基SD/Gal/Raf/-His/-Ura检测此DNA-BD/靶蛋白是否具有直接激活报告基因的活性，以及对酵母细胞是否具有杀伤毒性。 转化质粒 选择培养基 克隆生长情况 说 明 (含有Gal/Raf) pLexA-Pos SD/-His，-Ura
;。 ⑥ 因pGBKT7含Kan+抗性基因，在Kan+抗性平板上筛选阳性克隆。 ⑦ 测序验证CaM与gal4 DNA 结合功能区融合，插入序列读框正确、无碱基突变。 2.pGBKT7 – CaM转化酵母菌Y2HGold 将pGBKT7- CaM采用PEG/LiAc法转化酵母菌Y2HGold，涂布于SD – Trp固体培养基上，30° C 3-5天，菌落长出。 进行CaM自激活鉴定及毒性测定。 3.龙须菜高温胁迫表达cDNA文库
1-2天，含有HIS3编码序列的BD-靶质粒在含有外源His培养基中，将以10%-20%左右的频率随机丢失。 （2）将上述克隆，转铺固体培养基SD/-Trp/-Ura，30°C孵育2-3天。 （3）再挑取生长的单克隆，转入SD/-Trp/-Ura和SD/-His/-Trp/-Ura培养基中，筛选His表型缺陷的克隆，即得到只含有AD-文库杂合子的重组子。 （4）将His表型缺陷的克隆转化固体诱导培养基SD/Gal/Raf/-Trp/-Ura，以验证AD-文库能否直接激活报告基因的表达，弃
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