鸭瘟抗原(DVE)ELISA试剂盒

鸭瘟抗原(DVE)ELISA试剂盒

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  • 上海科梦达生物
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  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      上海科梦达生物

    • 检测范围

      当天发货

    • 检测方法

      酶联免疫ELISA

    • 适应物种

      仅限科学研究,不做诊断依据。

    • 标记物

      q 272974257

    • 样本

      血清血浆、体液、组织匀浆等

    • 灵敏度

      参考说明书

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥500.0
    规格:96T产品价格:¥700.0

    上海科梦达生物主营:动物血清血浆全血,各种浓度红细胞,ELISA试剂盒,生化试剂盒,PCR试剂盒,胎牛血清(Gibco/BI/Gemini/PAN等),细胞(细胞系,原代细胞),培养基,各类抗原,抗体,抗血清,感受态细胞,考马斯亮蓝蛋白快速染液等,液相检测, 气相检测 ,液质联用检测 ,常规生理生化测定,土壤检测,elisa检测服务(购买本公司ELISA试剂盒免费代测)

    检测原理
    试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪瘟抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗体呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
    样品收集、处理及保存方法
    1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
    3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
    5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
    自备物品

    1.酶标仪(450nm)
    2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    3.37℃恒温箱

    操作注意事项

    1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
    2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
    3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
    4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
    5.所有液体组分使用前充分摇匀。

    试剂盒组成

    名称 96孔配置 48孔配置 备注
    微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条
    标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
    样本稀释液 6mL 3mL
    检测抗原-HRP 10mL 5mL
    20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
    底物A 6mL 3mL
    底物B 6mL 3mL
    终止液 6mL 3mL
    封板膜 2张 2张
    说明书 1份 1份
    自封袋 1个 1个

    注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、10、20、40、80、160 pg/ml
    试剂的准备
     20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
    洗板方法

    1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
    2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    操作步骤

    1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
    4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
    5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

    结果判断
     绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

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