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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量现货,当天发货
- 供应商:
上海科梦达生物
- 检测范围:
当天发货
- 检测方法:
酶联免疫ELISA
- 适应物种:
仅限科学研究,不做诊断依据。
- 标记物:
q 272974257
- 样本:
血清血浆、体液、组织匀浆等
- 灵敏度:
参考说明书
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥700.0 |
上海科梦达生物主营:动物血清血浆全血,各种浓度红细胞,ELISA试剂盒,生化试剂盒,PCR试剂盒,胎牛血清(Gibco/BI/Gemini/PAN等),细胞(细胞系,原代细胞),培养基,各类抗原,抗体,抗血清,感受态细胞,考马斯亮蓝蛋白快速染液等,液相检测, 气相检测 ,液质联用检测 ,常规生理生化测定,土壤检测,elisa检测服务(购买本公司ELISA试剂盒免费代测)
检测原理
试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪瘟抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗体呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
操作注意事项
试剂盒组成
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗原-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、10、20、40、80、160 pg/ml
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
操作步骤
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
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文献和实验能力的测定方法。 2.观察血虚小鼠模型总抗氧化能力的变化。 3.观察中药对血虚小鼠模型总抗氧化能力的影响。 三、材料和方法 1.试剂:总抗氧化能力测定试剂盒(南京建成生物工程研究所) 2.材料:EF管(1.5ml) 120 支,一次性试管(10ml)60支,移液器(P20ul、P100ul 、P1000ul)各2把及配套枪头各200支,玻璃比色
混匀即可。 (5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。 二、试剂准备 在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤
产生假阳性反应。一般说来,在 3 天内测定的血清标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 2. 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。 ELISA 中用的蒸馏水或去离子
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