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文献和实验Cell 子刊:颜宁与西湖大学申怀宗团队合作解析 Nav1.7 高分辨率结构,有望助力止痛药研发
modulation through a-p helical transition of S6IV 为题发表在 Cell Reports 杂志。该研究报道了野生型 Nav1.7 和 Nav1.7(E406K)的冷冻电镜结构,分辨率分别为 2.2Å 和 3.5Å。与最新的与 HWTX-IV 或 ProTX-II 结合的 Nav1.7(E406K)结构相比,揭示了这些毒素通过 S6IV 段的 a 到 π 转变对通道门控进行变构调节。在这一文章中,研究人员报告了野生型(WT)Nav1.7 2.2Å 的高分
of mutants need to be made. 1) Design oligo - the forward and reverse primer can be bought ready-made (but may be cheaper to synthesise it), they prime to regions in front of and behind the cloning region (e.g. T7 promoter primer and T7 terminator primer
[2] ✦ CUT&RUN 原理: 图 4:CUT&RUN 原理 [3] 利用连有刀豆蛋白 A 的磁珠(concanavalin A-coated magnetic beads)结合细胞。使用非离子去污剂洋地黄皂苷进行细胞膜通透。然后孵育靶蛋白(如转录因子, TF )的抗体和 Protein A-MNase 。抗体和 Protein A-MNase 能够通过核孔进入细胞核,MNase 通过 Protein A 和抗体的介导切割靶蛋白附近的 DNA 序列。 MNase 的活化需要 Ca
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