10-O-[(E)-3,4-二甲氧基肉桂酰)梓醇

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用

-LB液体培养基，37o C，300 rpm振荡培养转化子至对数生长期。     2) 用0.5 mM IPTG诱导6小时，取出20ul培养液，加入等体积的SDS-PAGE上样缓冲液，100o C煮沸10分钟，离心取上清液进行SDS-PAGE检查转化子中各变种酶基因的表达情况。     3) 将高表达转化子5 mL菌液转接至500 mL氨苄- LB液体培养基中37 o C，300 rpm培养至对数生长期，用0.5 mM IPTG诱导8小时，收集菌体。    

自动DNA合成仪仪器的故障排除

或更少。因为在偶联步骤中允许少量水的存在，故这种水分含量的溶剂可用于合成。许多溶剂都是吸潮的，因此所有溶剂的容器都应该塞紧，只能短时打开，通常没有必要在氩气中储存。酸和碱：氯化的碳氢化合物常含有微量盐酸，在合成期间会使二甲氧基三苯甲基损失。通过下列方法可以进行检测：在5ml溶剂中溶解lmg的5，-O-二甲氧基三苯甲基脱氧核糖核苷酸衍生物，测定495nm处的吸收值，应该没有吸收。极性溶剂中的一级和二级氨能切断寡核苷酸与载体之间的键，可以用茚三酮试验检测。金属离子：虽然溶剂中没有这一问题，但作为干燥

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

葡聚糖酶异形体2   (G2 ) 的 MALDI- T O F M S 信号增强 7 倍 。这个 结果证明蛋白质和基质在低温（4° C ) 下共结晶去除残留的盐、去垢剂和考马斯亮蓝染 料 ，可有效地增强MALDI-TOF  M S 信号。2. 材料 ( 1 ) 1X 电泳缓冲液：25 mmol/L Tris-HCl，192 mmol/L 甘氨酸，0.1% ( m/V）SDS，pH 8.3 [ 用 10X TGS (Tris/甘氨酸/SDS) 电泳缓冲液（Bio-Rad，产品目录号：161