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文献和实验Anti-DYKDDDDK tag (L5) Affinity Gel
1. Purifying DYKDDDDK-tag fusion proteins from crude E.coli extracts. 1) Grow the bacteria cells under the condition that induce production of DYKDDDDK-tag fusion proteins. 2) Harvest the cells by centrifugation at 10,000 rpm for 20
凝集素,四聚体球蛋白,含有糖基结合位点,因此 ConA 是一种糖类结合蛋白。ConA 磁珠能与细胞膜上的糖蛋白结合,从而吸附细胞,使对细胞的实验操作可视化,减少在后续实验过程中的细胞的损失。 不建议使用离心法代替 ConA beads,因为离心法不适合于低细胞数,在洗涤的过程中,损失很大,而且大肠杆菌残留的 DNA 无法进行可靠的校准。 5.做 ChIP-seq 的时候不需要二抗,CUT&Tag 二抗的作用是什么?二抗是必须的吗?可以用带修饰(比如 HRP 修饰)的二抗
Purification and Characterization of His-Tagged Antibody Fragments
, typically His6 , fused to the recombinant protein. In the case of antibody fragments that are composed of different chains, e.g., Fv and Fab, the site of attachment for the His6 tag has to be carefully chosen, and mild chromatographic conditions
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